海洋微生物分离及其产抗菌物质的筛选研究.pdfVIP

发酵工程学科的进展 ——第四班空回发酵工程学术讨话套论文集 海洋微生物分离及其产抗菌物质的筛选 桂林“2，朱仁发2，吴茜茜2，陈昌宝2，潘仁瑞2。蔡敬民1’2 (1_安徽农业大学生命科学院合音肥学院生物与环境工程系台肥230022) 摘要：本研究对从山东青岛、烟台等海边采集曲不同样品采用平板稀释法分离海洋微生 暂，共分离到128株海洋细菌，36株海洋放线菌。同时对舟商海洋微生曲采用纸片法筛选产 抗苗物质的微生物，结果表明从海水泡沫样和海泥产抗酋物质比侧高于其他样品，抗啤酒酵 母和枯草杆苗的几率和活性明显高于大肠秆酋和_|||}曲霉．奉项目研究为后续分高新曲抗生 素提供基础研究． 关键词：海洋细苗I海洋放线菌}抗菌物质 随着陆生微生物资源开发日益枯竭，开发新的抗生索几率越来越低，另一方面，耐传 统的抗生素的耐药病原菌广泛传播，如耐甲氧西林的金葡菌等。急切的开发新的抗生素 成为科学家们的一个重要的任务。因此需要积极拓展微生物资源开发的范围，从海洋微 生物中开发新的抗感染药物具有重要的意义。 占地球面积的70％多的海洋的微生物多样性[13和其特殊的生存环境(高盐、高压、低 温、低光照和寡营养)，从而可合成一些结构新颖的抗生素，这是陆生微生物所不具备的。 目前有大量的文献报道c241从海洋微生物中开发新的抗生索和其他药理活性化合物。本 课题研究不同样品的分离的微生物抗菌活性的分布情况和抗测试菌活性情况。 1材料与方法 1．1材料与方法 1．1．1测试菌 cerevisiae)，枯草芽孢杆菌(Bacillussubtdlis)，大肠杆菌 啤酒酵母(Saccharomyces (Escherichia toll)，黑曲霉(Aspergillusniger)。 1．1．2培养基， 1．1．2．1测试菌培养基 PDA培养基I牛肉膏蛋白胨培养基；麦氏培养基。 1．1．2．2分离培养基 海洋细菌分离培养基：牛肉膏蛋白胨培养基(以ASW代替蒸馏水配制)，加入50ug／ mL制霉紊． 人工海水(ASW)配方；NacIz 2．09，KCl 9．59，MgClz·6H200．59，MgSO‘·7H20 基金项目：安徽省优秀青年科技基金项目资助 作者简介：桂林(1978一)，男，安徽桐城人．微生物学硬士研究生． 桂林等：海洋微生物分离及其产抗茵物质的筛选 3．59，CaCIz·2H20 至1000mL。海水微量元素(1)(g／L)：柠檬酸0．6，K2HPn 3．2，Na2C0310．4．柠檬酸铁 0．3，MnCl21． 81，ZnSo．·7H200．22，CuSO,·5H200．079，CdNO。·6H200．0499。 1．1．2．3发酵培养基 细菌发酵培养基：牛肉膏蛋白胨液体培养基(以ASW代替蒸馏水配制) 放线菌发酵培养基；GBP液体培养基“3 1．1．3样品 本课题组从山东青岛，烟台等海边城市于2005年8月份采集各种类型的样品，样品 包括海水泡沫样，海砂，海水。海水，藻类，海洋动物，腐木等。 1．2方法 1．2．1样品处理和菌种分离 挑取少量样品用无菌水按梯度稀释成3个浓度，稀释涂平板，于28℃培养。划线纯 化培养，斜面保菌。 1．2．2菌种发酵条件； 海洋细菌：在试管中装5mL液体牛肉膏蛋白胨培养基(加ASW)，接种后于25℃， 200rpm摇床培养3天。 海洋放线菌：在试管中装5mL 培养4天。 1．1．3初筛方法 ． 海洋细菌、放线菌、真菌发酵液直接用滤纸片法囤测其抑菌活性，记录其抑菌圈直径大小。 2结果与分析 2．1海洋细菌分离与初筛结果统计分析 主。各类样品中以海泥和海洋动物样品分离出细菌菌落形态多样性好，腐烂木头、竹子