促卵泡素与促黄体素对猪卵母细胞体外成熟的影响研讨.pdfVIP

巾灏畜牧普医学会动物繁殖学分会第十童届学术研讨会论文集 促郛泡素与促黄体素对猪卵母细胞体外成熟的影响 张晓华，罗光彬+，李东全，朱增娟，袁水桥 淀鬻农盈丈学畜牧善医学院，辽宁沈疆110161) 摘要：探讨了促卵泡素(FSH)与促黄体素(LH)对猪卵母细胞体外成熟的影响。利用鼯体猪卵巢 申进大举夕卜培养，比较和分楫备组成熟率酶差异。结果得瘫FSII与L}l在簧移母细胞舔外成熬过程 中可发挥促进作用。成熟液中单独添加FSH时，其最佳浓度为10IU／ml；单独添加LH时，其最健 浓度秀lIU／ml，离浓度戆LH对猪努母细胞嚣外成熬妨促进效暴呈下降趋势；瀚跨添加薅辩激素盼， o者浓庹均为IIU／ml可得到最佳的成熟效果。 关键词；猪努母皴胞；臻靖成熟；FSH；LIt 促卵泡素(FsH)与促黄体素(LH)是参与卵母细胞成熟的最熏要蛋白质激素。在猪卵母细胞 体外成熟培养中使用较多。大部分研究中已经证实了促性腺激素(FsH、LH)在猪卵母细胞体外成 有报道证明eCG与hCG对促进卵母细胞的体外成熟更为有效陬8l。因此，需臻进一步探讨FSH与 Lid对猪卵母细胞体外成熟的影响，确定其对猪卵母细胞体鲫成熟的作用，找到其合理的使用剂量。 1材料每方法 l。1猪卵眨卵母细胞复合物(COCs)的收集与成熟培养 蘩取剐屠宰母猪酶雾巢救入30—35℃戆生理盐承孛在3夺时态运至实验室。耀带春王2号针头翡 魏质均匀并具有3层以上致密卵丘细胞的COCs进行培养。 舜母缀脆培养采羯镦滚法，每个徽漓501a l左右，矿物油覆盖，在C晓培养箱内平衡麓{冀上。 采集的COCs用PBS(杜氏磷酸盐缓冲液)洗3次，然后用成熟培养液洗3次，移入已平衡好的培 养漓中，每漓放COCs10—20牧，在39℃，5％C02的空气期饱和湿度下培养。 圆浓度的FSH和LH(宁波激豢制品厂)。 1．2舜母细胞成熟攀定 培养结束后，将COCs穆入O．1％透明质酸酶液中处理2。3分钟，机械吹打将卵丘细胞去净，猩 4X 10倍实体显微镜下双察第一极体是否存在，以第一极体排出作为辨母纽胞成熟的标准。胞质破 裂、核络构消失或结构损伤的卵母细瓞归于死亡或退证。 1．3试验设计 l。3。1躔浓度对猪卵母细胞体外成熟鳓影响 10IU／ml LH，成熟培养45h。试验重复5次。 差。3．2埔每FSH协同对猪努母细胞体外成熟婚影囔 IUlml 对照缀只添加疆，浓度为lI形ml，成分为mT饼挎9+lLH。各试验缀在对照维基础上再 添加FSH，浓度分别为l，5，10IU／ml。成熟培养45h。试验重复5次。 作者籍奔：张浇华，女，1980年9胃，淀辩农监大学蛮狻兽医学院在读霹究生。 ‘通讯作者：罗光彬(1959-)，菊，沈阳农蛾大学畜牧兽医学院，博±，教授。 电话 E-mail：luoguangbin@126．com 180 巾垦崔教劳医学会动物繁殖掌分会第十三鼹学本研讨会论文集 曼皇缫鼍舅量舅曩曼曼篡粤量皇缫詈曼曼寰置曼曼皇曾曼曼黧量皇曼燃鼍皇曼冀量III黑皇曼曼麓曼曼笪嬲曼曼曼爆曼舅笪嬲曼皇岂糕曼曼璺懋曼曼葛糕舅皇曼拦舅量篁糟曼皇曼麓曼 1．3．3 FSH浓度对猪卵母细胞体外成熟的影响 10IU／mlFSH。成熟培养45h。试验重复5次。、 1．3。4 FSH与LH协圊对猪卵母细胞体外成熟盼影响 1U／ml 对照组只添加FStt，浓度为1IU／ml，成分为mTCMl99+1FSH。各试验组在对照组基础上 再添趣瑗，臻浓度分舅l戈l，S，lO王U屈l，成熟培养45h。试验重复纛次。 1．4统计分析 所褥资料采用spssll．5统计软件进行显著性检验。对成熟率进行单因素方差分析，多重比较用 邓肯式法。P0．05时确定为差异显著。 图1未成熟的COCs 图2培养48h后的cocs 图3排出第一极体的卵母细胞 1lnnnuturedCOCs 2COCswith