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第05章 酶
Enzyme;酶在生物体内的重要性;生活中的酶;酶学研究简史;1908-1913年 在皮革软化过程中酶取代粪便
1926年,Sumner首次从刀豆中提纯出脲酶结晶,科学家发现酶是蛋白质 。
1941-1943年 生产胰岛素和胰蛋白酶的新方法
1963年 碱性蛋白酶--洗涤剂用酶的突破
1965-1974年 淀粉工业的重大突破
1982年,Cech首次发现RNA也具有酶的催化活性,提出核酶(ribozyme)的概念。
1984-1986年 第一个由基因修饰的微生物 (GMO) 生产的酶
1992年 建立用于酶工业生产的克隆表达
1995年,Jack W.Szostak研究室首先报道了具有DNA连接酶活性DNA片段,称为脱氧核酶(deoxyribozyme)。
; 酶的应用;关于酶化学本质的分歧;对RNA型催化剂的命名;抗体酶(Abzymes); 酶的催化特点The Characteristic and Mechanism of Enzyme-Catalyzed Reaction ;酶与一般催化剂的共同点
在反应前后没有质和量的变化;
只能催化热力学允许的化学反应;
只能加速可逆反应的进程,而不改变反应的平衡点;
用量少而催化效率高
能降低反应活化能;催化过程与非催化过程自由能的变化;(一)酶促反应具有极高的效率 ;一种酶仅作用于一种或一类化合物,或一定的化学键,催化一定的化学反应并生成一定的产物。酶的这种特性称为酶的特异性或专一性。;根据酶对其底物结构选择的严格程度不同,酶的特异性可大致分为以下3种类型:;相对专一性;α-葡糖苷酶;(三)酶促反应的可调节性;(四)反应条件温和,易失活;(五)无副反应;第二节 酶的命名与分类The Naming and Classification of Enzyme;一、酶的命名
1. 习惯命名法——推荐名称
1)根据作用的底物命名
2)根据催化反应的类型命名
2. 国际系统命名法——系统名称
系统名称=底物(两种底物用“:”隔开)+催化反应的类型;一些酶的命名举例;二、酶的分类
1.氧化还原酶类(oxidoreductases)
2.转移酶类 (transferases )
3.水解酶类 (hydrolases)
4.裂解酶类 (lyases)
5.异构酶类( isomerases)
6.合成酶类 (ligases, synthetases);氧化还原酶类(oxido-reductases);转移酶类(transferases);水解酶类(hydrolases);裂合酶类(lyases);异构酶类(isomerases);合成酶类( synthatases);;第三节酶的分子结构与功能The Molecular Structure and Function of Enzyme ;酶的不同形式;一、 酶的分子组成;*各部分在催化反应中的作用;金属离子的作用
稳定酶的构象;
组成酶的活性中心;
参与催化反应,传递电子;
在酶与底物间起桥梁作用;
中和阴离子,降低反应中的静电斥力等。;小分子有机化合物在催化中的作用 ;辅助因子分类
(按其与酶蛋白结合的紧密程度);二、酶的活性中心;或称活性部位(active site),指必需基团在空间结构上彼此靠近,组成具有特定空间结构的区域,能与底物特异结合并将底物转化为产物。;溶菌酶的活性中心;活性中心内的必需基团;;(一)酶的催化作用与活化能
活化能概念:
加速化学反应的两条途径:
1.提高反应温度
2.降低化学反应的能阈;(二)酶-底物复合物的形成与诱导契合假说;中间产物学说;酶底物中间复合物存在的证据;*诱导契合假说(induced-fit hypothesis);;(三);第四节 酶促反应动力学;概念
研究酶促反应速度及各种因素对酶促反应速度的影响,并加以定量的阐述。
影响因素
酶浓度、底物浓度、pH、温度、抑制剂、激活剂和变构剂等。;研究酶促反应动力学的意义;一、底物浓度对反应速度的影响;;;当底物浓度高达一定程度;(一)米-曼氏方程式;米氏方程的推导;;当反应速度为最大反应速度一半时;(二)Km与Vmax的意义; Vmax
定义:Vmax是酶完全被底物饱和时的反应速度,与酶浓度成正比。;定义 — 当酶被底物充分饱和时,单位时间内每个酶分子催化底物转变为产物的分子数。
意义 — 可用来比较每单位酶的催化能力。
;(三)Km与Vmax的测定;双倒数作图法;二、酶浓度对反应速度的影响;三、pH影响酶活力的机理;四、温度对酶促反应速度的影响;五、抑制剂对反应速度的影响;酶的抑制作用的意义; 抑制作用的类型;(一) 不可逆性抑制作用;羟基酶的抑制;巯基酶
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