腐败尸体提取物的DNA鉴定1例.docVIP

精品论文 参考文献 腐败尸体提取物的DNA鉴定1例 （广西北流市公安局刑事科学技术室；广西北流537400） 　　1案例资料 　　1.1 案情与样本 　　2016年某日，在某地发现1具女性尸体，高度腐败，呈侧卧状，衣着整齐，双手反绑于身后，可见大量蛆虫，为机械性窒息死亡，推测死于1个月前。进行现场勘察，提取捆绑物、死者阴道试子、子宫口试子、阴道试子、子宫口试子，同时取肋软骨，据尸体所穿衣物，与近期通报的失踪人口父母进行对比，取4对可疑对象的父母血样送检，进行亲缘鉴定。从尸体指甲垢中提取ＴＮＡ，保存。 　　1.1 DNA检验 　　主要试剂，二甲苯、蛋白酶K、SiO2、硫氰酸胍、异戊醇、DNA标准样本9947A(阳性对照）。仪器设备：紫外分光度计，DNA标准样本9947A，ＰＣＲ仪等。采用有机法提取组织DNA。采用硅胶模法取软骨，进行骨密度DNA检查，去掉软骨附着覆盖组织，蒸馏水冲洗干净，自然晾干。70%乙醇消毒，锉取骨密质0.8g，15ml试管盛放，加入0.5ml/L的EDTA-Na2脱钙液8ml，震荡摇匀。56deg;℃水浴脱钙，持续48h，每隔24h更换1次脱钙液。1000r/min离心，2min,弃上清，蒸馏水洗涤2次，采用ＤＮＡ　Ｍｉｎｉ试剂盒，提取模板ＤＮＡ。采用ＱＩＡＧＥＮ公司推荐的方法，按照试剂盒上说明书操作，进行16ＳＴＲ基因座复合扩增，采用遗传分析仪进行电泳分析，获得ＳＲ分型图与怀疑对象父母分型进行对比，确定亲缘关系。 　　2结果 　　扩增反应，证实其为刘某夫妇的女儿，认定亲缘关系，可靠性较高。 死者肋软骨D8S1179为12/13，D21S11（24/31）、D7S820（10/12）、CSF1PO（11/12），D3S1358（15/18），TH01（7/9），D13Ｓ317（9/9），D16S530（10/12）。同时取得指甲垢中的基因座，备份，以待确认犯罪嫌疑人取样对比。 　　3 讨论 　　在分子生物学、基因生物学应用于法医学之前，高度腐败尸体的身份鉴定、死因分析、定性、破案存在许多难题[1]。DNA鉴定属于物证范畴，是指DNA同一认定，通过分子生物学，对犯罪现场遗留的生物物证DNA于犯罪嫌疑人NDA、尸体的DNA信息与怀疑为亲缘关系着进行对比。耦合概率是衡量同一认定的标准，NAD鉴定的耦合改良为1/1016之一，理论上NDA鉴定的可靠性极高，等同于100%的耦合概率。值得注意的是，有报道显示DNA已可进行人工改造进行改变，甚至进行伪造，或通过影响检测技术化学反应，影响检测结果，并不在此次研究讨论范畴。DNA的主要作用在于锁定犯罪嫌疑人、确定死者成分、打拐等，被广泛用于法医学。近年来，NDA检测技术飞速发展，技术所有的生物组织都可进行DNA鉴定。犯罪分子在犯罪过程中，不可避免会遗留生物学影响，如血迹、毛发、精液、痰液等，为DNA鉴定提供突破口。生物组织中的NDA保存时间也较长，在软组织保存时间相对较短，在骨中理论上可永久保存。对于无名尸体，若时间过久，或缺乏衣着等信息，或尸体被烧毁，确认死者较困难，可采集未被破坏的NDA进行鉴定。我国每年依靠DNA数据库对比确认被拐儿童超过200名，部分被拐儿童甚至被拐数十年。本例对象，留取的指甲垢便有死者与犯罪分子进行争斗留下的皮肤、血迹等组织，上报国家库，在今后若遇到串并得案件，便有助于快速确认犯罪分子，可大幅度的减少疑难案件。研究中，通过采集死者的肋软骨，与四对服夫妇对比，确认亲缘关系，最终确认的死者的身份。死者身份的确认对于犯罪嫌疑人的确认具有重要意义，有助于办案[2]。DNA鉴定除进行定性分析外，还可进行定量分析，不同组织不同时间组织生物学变化特征不尽相同，NDA物质含量也会发生变化，为死亡时间、死因推断提供了可能，目前已经有用于死亡时间推荐的DNA定量分析技术，但这些技术尚不成熟，同时存在较多的干扰因素[3]。 　　DNA鉴定并非外能灵药，特别是在进行犯罪嫌疑人确认时，可能会因为保存、取证不当，导致功亏一篑，著名的辛普森案便是典型的例子。随着我国居民文化水平的上升，网络的普及，高智商刑事犯罪明显增多。在进行DNA取样、处理、分析时，应规范操作，确保鉴定可靠性，合理合法。当前，我国在NDA鉴定的法律法规方面并无完善，也限制了DNA鉴定证据的使用[4]。实验室工作人员需要了解不同的NDA材料所提取、保存方法，避免造成难以挽回的损失。DNA鉴定本身也存在技术缺陷，本次研究采用8个位点，较之前的6个位点耦合率明显下降，但不排除出现鉴定出错，有必要采用多种鉴定技术结合，引入更先进的鉴定方法，降低耦合率，避免冤假错案，既是对社会的负责，也是法医工作者的责任与义务[5]。 　　在进行ＤＮＡ鉴定需注意要点：①采集过程中，需要有明确的标准，穿防护服，带口罩、手套、帽子，避免