一、项目名称结构特异性醇酯制备用高选择性工业酶的高效.PDFVIP

一、项目名称 结构特异性醇/酯制备用高选择性工业酶的高效创制关键技术 二、提名单位及意见 提名单位：中国石油与化学工业联合会 推荐意见： 基于绿色生物制造的国家重大需求，围绕生物技术前沿领域的工业酶高效创制关键技 术问题，开展工业酶的定向筛选、功能强化、高效表达及应用技术研究，具有重要的科学 与应用价值。该项目以高附加值结构特异性功能醇/酯制备用高选择性脂肪酶和氧化还原 酶为研究对象，针对现有工业酶选择性差，工业适应性弱，表达制备成本高以及催化反应 效率低的关键技术难题，建立了选择性反应导向的酶源微生物资源工程新策略，获得了优 势酶源微生物及其高选择性同工酶；解析了高选择性酶的催化机制，发明了针对催化剂工 业属性的定向强化技术；基于转录组学解析了工业酶表达调节机制，发明了高选择性酶的 高效规模化调控制备及催化应用关键技术。开发了具有自主知识产权和适合工业化要求的 高选择性、高活性、高稳定性工业酶的高效创制及应用技术体系，填补国内空白，打破国 际技术壁垒，推动了我国相关产业的技术进步和持续健康发展。该项目对工业酶催化剂中 的特色品种进行重点开发，建立工业酶基因定向筛选、分子改造、高效表达与规模化制 备、绿色工艺开发和应用的技术创新体系，进而辐射食品加工、精细化工等生产和应用领 域。项目成果在江苏一鸣生物股份有限公司、石家庄诚志永华显示材料有限公司等生物催 化剂生产和应用企业得到推广应用，创造了显著的经济效益与社会效益。 申报材料真实有效，相关栏目符合填报要求。提名该项目为国家技术发明奖二等奖。 三、项目简介 基于生物催化的生物制造技术具有催化活性高、选择性强、条件温和等特点，属于绿 色制造加工过程，以生物催化为核心的绿色生物制造技术在社会可持续发展技术体系中具 有重要的地位和突出的战略高度。基于以上特点，生物催化研究已成为发达国家的重要科 技与产业发展战略。本项目属于酶工程和生物化工技术领域。从国家重大需求出发，建立 高选择性酶的定向挖掘、工业属性功能强化、高效表达和规模化制备、反应导向应用工艺 开发的技术创新体系。（1）建立了选择性导向的微生物筛选策略，获得了具有自主知识 产权的选择性酶系丰富的根霉和酵母资源库；建立了高选择性酶特异性挖掘方法，获得了 选择性脂肪酶和anti-Prelog 选择性氧化还原酶簇。（2）采用X-ray衍射和NMR技术解析了 酶结构，阐明了氧化还原酶以及脂肪酶催化机制；基于酶催化反应机制，建立了精准设计 技术和体内同源重组定向强化新技术，获得了选择性反转、底物谱拓宽、热稳定性提高的 突变酶。（3 ）基于转录组学和蛋白质构效关系研究，揭示了外源蛋白高效表达的调节机 制与酶折叠分泌机制，建立了高效表达技术，实现了酶的规模化高密度发酵，并建立了在 1 结构特异性醇/酯中的应用技术。 研究成果授权美国发明专利2 项(US 9422583B2 ，US15/038364) ，授权中国发明专利 25 项，申请国际PCT 发明专利3 项，获得江苏省2014 年度百件优质发明专利1 项，2015 年度无锡市发明专利金奖1 项；发表论文53 篇，其中SCI 论文39 篇；完成教育部、中国 石油和化学工业联合会组织的成果鉴定5 项。 四、客观评价 4.1 成果鉴定 序 成果名称 组织鉴定单位/鉴定时间/鉴 鉴定结论 号 定证书号 1 新型 1,3-位置选择性米根霉脂肪酶的强 中国石油和化学工业联合 国际领先 化设计制造及其在功能油脂中的应用 会/鉴字[2017]第069 号 2 羰基还原酶催化性能表征与强化设计及 中国石油和化学工业联合 国际领先 其不对称合成手性醇酸化合物 会/鉴字[2017]第068 号 3 华根霉脂肪酶生产菌种分子改造及其产 教育部/鉴字[教 BP2012]第 国际领先 业化关键技术研究 010 号 4 华根霉脂肪酶在毕赤酵母中的高效表 教育部/鉴字[教 BP2010]第 国际领先 达、定向进化及其应用研究