体内药物分析对分分析方法的特殊要求.ppt

⑷体内实际样品测定：有时用体外建立的方法去测定体内取得的实样时，会得出错误的结论。故要强调对药物体内过程有一定程度的了解。 一般情况下，浓度与RSD值间存在反比关系 Your company slogan 体内药物分析对分析方法的要求 体内药物分析的特点 1.干扰物质多,测定前需预处理 . 2.样品量少、不能重复取样. 3.被测成分浓度低,对分析方法的灵敏度和专属性要求较高. 4.有时需要测定缀合物和代谢产物. 5.供药物浓度监测的分析方法要求简便、快速. 6.工作量大，要有一定的仪器设备. 7.药物的化学结构与存在状态有变化. 8.样品的稳定性需特别注意 体内药物分析的特殊性 生物样品中的药物浓度—决定分析方法的首要要因素 1 生物样品中药物或其特定代谢产物的浓度低、样品量少 —难以通过增加取样量提高方法灵敏度 3 不能调整分析样品—通过选择适当的分析方法 适应样品分析需求 4 药物在体内的存在情况—确定分析方法的依据 2 体内药物分析与普通药物分析的异同 分析目的 分析方法 样品性质 体内药物分析 为新药研发提供依据，进行临床用药监护或中毒解救 应当用灵敏度和选择性较高的分析方法，且简便快捷 样品中的药物浓度很低，且呈动态变化，波动范围常达三个数量级以上 普通药物分析 检验药品质量是否符合标准 一般常规方法即可 样品中的药物浓度较高，通常在已知的范围内 ①分析目的：同：二者均以药物应用的安全性和有效性为目的 异：普通：以控制药品质量为目的 体内：以考察体内药物浓度、状态和过程为目的 ②分析方法： a、灵敏度：普通：一般可通过增加样品量来提高灵敏度，化学分析法、仪器分析法均可 体内：一般不能通过增加样品量来提高灵敏度，且样品中血浓极低，对方法灵敏度要求较高，定量测定只能用仪器分析法 b、选择性：普通：仅考虑原料及制剂中有关物质、制剂中的辅料、复方及中药材中共有组分干扰 体内：除考虑干扰成分外，还有内源性成分、代谢物的干扰，选择性要求很高 ③样品的性质：普通：正常情况下，样品中药物的化学结构、存在状态、含量等一般均保持恒定 生物样品：化学结构发生变化 受代谢酶的作用，会生成代谢物 存在状态发生变化 可与生物大分子不同程度结合 药物浓度发生变化 药浓动态变化，波动范围3个数量级以上 一、待测药物的理化性质及体内存在状况 待测药物的理化性质 药物在生物体内的存在状况 药物在生物体内的生物转化(代谢)途径 准确测定生物样品中的药物或其特定代谢物通过一定的生物样品预处理使待测物从结合物或缀合物中释放出来。 预处理 二.稳定性要求 生物样品量较大时，在一个工作日内难以完成全部样品的分析；有时样品需进行复测。因此生物样品及其预处理后的残渣或溶液的稳定性就显得尤为重要。需要对样品的存放条件和时间进行考察，以保证分析结果的准确、可靠 方法稳定性 生物样品的稳定性 稳定性 1.方法稳定性：首先考察待测药物的标准品（内标、衍生化试剂）或其分析溶液在实验室温度、湿度、光照及暴露空气等条件下的稳定性； 在分析方法的建立时要考虑模拟生物样品的预处理过程（提取、净化及相转移）及待测物（蒸干后的残渣及其溶液）在室温或冰箱中存放的稳定性。 2.生物样品的稳定性 短期稳定性： 主要考察模拟生物样品在室温、4℃或－20℃以及冻－融循环条件下的稳定性 长期稳定性：主要考察生物样品长期冰冻（－20 ℃或－80℃）后的稳定性，考察期限从生物样品的采集到分析完毕的整个时间区间。 要求：室温下存放一般仅考察1个工作日（如1、2、4、8、24h） 冰箱中存放需考察数个工作日（或数星期、数月） 三.实际生物样品的测试 目的：考察代谢产物对药物、内标物质的干扰情 况，进一步验证方法的可行性 原因： 1、生物样品量少 2、药物或活性代谢产物浓度低 3、内源性物质的干扰 【药物在体内可能与内源性物质结合(如血浆蛋白结合物)或代谢生 成数个代谢产物及其进一步的结合物(或缀合物)】 4、生物的个体差异较大 5 、不能完全确认是否适合于实际生物样品的测定 用于实际生物样品分析之前： 需要验证 (validation) 分析方法的可行性与可靠性 方法验证时应考虑影响分析方法的所有可变因素： 取样