分子生物学13.pptVIP

五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （1）断裂基因（split genes） 五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （1）断裂基因（split genes） 真核生物大多数核mRNA基因都是断裂基因，内含子数目可高达60个（0 ~ 60） 不少核tRNA基因也是断裂基因，但内含子较小（10 bp左右），且只有1个，一般在相应于反密码子的碱基附近 一些rRNA基因也是断裂基因 线粒体和叶绿体中也有断裂基因 五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （2）核mRNA前体的剪接 Step 1：内含子内的一个腺苷酸的2’ 羟基进攻连接内含子 5’ 端与外显子的磷酸二酯键，产生一个游离的外显子（5’ 外显子）与一个套环（lariat）结构（内含子 + 3’ 端外显子）的中间产物 Step 2： 5’ 端外显子的 3’ 羟基进攻连接内含子3’ 端与外显子的磷酸二酯键，使两外显子连接起来，并产生套环状的内含子 Simplified mechanism of nuclear mRNA precursor splicing 五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （2）核mRNA前体的剪接 剪接信号（splicing signals） 高等真核生物 5’-AG/GUAAGU——YNCURAC—YnNAG/G- 3’ Y：嘧啶（U or C） Yn：约由9个嘧啶组成 R：嘌呤（A or G） A：形成套环结构的分枝点 五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （2）核mRNA前体的剪接 剪接信号（splicing signals） 酵母 5’-AG/GUAUGU——UACUAAC—YAG/G(UU)- 3’ 五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （2）核mRNA前体的剪接 剪接信号（splicing signals） 剪接信号发生变化，则剪接就会受到影响（改变） Critical signals for splicing 五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （2）核mRNA前体的剪接 剪接体（spliceosomes） 核mRNA前体、snRNAs (snuRNAs)与蛋白质的复合体，能进行核mRNA前体的剪接 snRNAs (snuRNAs): small nuclear RNAs，即核小分子RNA，有U1, U2, U4, U5, U6 Sequences and secondary structures of the human snRNAs 五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （2）核mRNA前体的剪接 剪接体（spliceosomes） snRNAs是用于识别剪接信号的，它们与蛋白质一起，组成核小分子核糖核蛋白（small nuclear ribonuclear proteins, snRNPs） 与snRNAs相应，有U1 snRNP, U2 snRNP, U4 snRNP, U5 snRNP, U6 snRNP 五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （2）核mRNA前体的剪接 剪接体（spliceosomes） U1 snRNP 能与 5’ 剪接位点的保守序列配对，这种配对（结合）是剪接所必需的，但光有配对还不足以促成剪接 The effect of wild-type and mutant 5’-splice sites with wild-type and mutant U1 snRNAs on splicing Splicing No splicing Splicing Splicing No splicing No splicing 五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （2）核mRNA前体的剪接 剪接体（spliceosomes） U6 snRNP 能与内含子的5’ 端配对，在剪接过程中还与U2配对，这些结合都是剪接所必需的 五、转录后的基因表达调控 1. RNA剪接（RNA splicing） （2）核mRNA前体的剪接 剪接体（spliceosomes） U2 snRNP 能与分枝位点周围的序列配对，且能与U6相互作用（通过碱基配对），对确定分枝位点及剪接都是必不可少的 Base pairing betwee