负载紫杉醇的双配体纳米粒的体外生物性能评价.docVIP

精品论文 参考文献 负载紫杉醇的双配体纳米粒的体外生物性能评价 1.南华大学附属第二医院妇产科 湖南衡阳 421001；2.南华大学附属第二医院超声科 湖南衡阳 421001 摘要：目的 体外评价带有叶酸和穿膜肽双配体的、负载紫杉醇纳米药物输送系统的生物性能。方法 分别用小分子紫杉醇和双配体紫杉醇纳米粒孵育MDA-MB-231细胞及A549细胞，24 h后利用MTT法测定各组细胞的相对存活率。采用SPSS13.0统计分析软件进行统计学分析，所有数据均以ˉ x s表示。结果24h后MDA-MB-231细胞及 A549细胞的相对存活率均为小分子紫杉醇组gt; 双配体紫杉醇纳米粒组（Plt;0.05）。结论 叶酸的靶向作用与穿膜肽的穿膜作用能够协同提高药物在靶细胞的聚集，进一步增强药物输送系统的治疗作用，为开发新型、高效药物输送系统提供基础。 关键词：紫杉醇；叶酸；纳米药物输送系统 Abstract：Objective To evaluate in vitro biological activities of paclitaxel nanoparticles with dual ligands.Methods The cells were incubated with free paclitaxel or H-F-Tat-P NPs，and then evaluated by MTT method.Results The results of cell viability for both two cell lines were：free paclitaxel gt; H-F-Tat-P NPs.（Plt;0.05）.Conclusion The strategy on nanomedicine with dual ligands can enhance the cellular uptake of drug thereby improving promising its chemotherapeutic efficiency.The nanoparticle system could be used as a promising cancer cell specific delivery system for further investigation ． Key words：folate；paclitaxel；nanoparticle system 细胞穿膜肽又称蛋白转导域，是一类由少于30个氨基酸组成的多聚阳离子短肽片段，可以携带比其分子量大100倍的外源性大分子物质进入细胞内，且对宿主细胞无显著毒副作用[1-2]。Tat（transactivating transcriptional activator peptide）是目前研究最多、应用最广泛的穿膜肽[3-4]。由于细胞穿膜肽无靶向性而限制了它的在体应用[5]。叶酸是天然存在的小分子物质，几乎无免疫原性，且叶酸受体在大部分恶性肿瘤组织，比如乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌等组织中高度表达，而在正常组织中几乎不表达[6-7]。因此，叶酸作为抗肿瘤药物输送系统的靶向配体具有良好的理论基础和广泛的应用前景。 结合前期已经成功制备了负载紫杉醇的双配体纳米药物输送系统（Heparin-Folate-Tat-Paclitaxel Nanoparticles，H-F-Tat-P NPs）[8]，本文我们体外评价该系统的生物性能，为进一步研究其体内生物活性，特别是开发具有高效治疗作用的药物输送系统提供基础。 1 材料与方法 1.1材料与仪器 1.1.1 材料 人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人肺癌细胞A549（南方医院肿瘤研究所保存）；RPMI 1640细胞培养基、新生牛血清、0.25%胰蛋白酶、胎牛血清、L-15细胞培养基（广州速研生物科技有限公司）；3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）（Sigma，America）；氯化钠（NaCl）、十二水合磷酸二钠（Na2HPO4middot;12H2O）、氯化钾（KCl）、磷酸二氢钾（KH2PO4）（广州铭旺生物科技有限公司）；二甲基亚砜（DMSO，Sigma，America）。 1.1.2 仪器设备 细胞计数板、细胞培养皿、载玻片、盖玻片、移液器枪头、离心管、EP管、6孔板（广州杰特伟公司），1000mu;L微量加样枪times;1支、20-100mu;L微量加样枪times;1支、1-20mu;L微量加样枪times;1支（法国吉而森公司），CP225D电子分析天平（Sartorius，Germany），电热恒温水浴锅（北京市永光