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酶标法测定鸡骨草提取物有效成分的含量
精品论文 参考文献
酶标法测定鸡骨草提取物有效成分的含量
广东省湛江卫生学校 524037
摘要:目的:建立酶标法测定鸡骨草提取物有效成分含量的方法。方法:在单因素试验基础上,利用正交实验优化酶标法测定鸡骨草提取物含量的反应条件。结果:酶标法测定骨草提取物有效成分含量的最优组合为反应温度30℃、测定波长为510 nm、反应时间为12 min。芦丁质量浓度在0.0~0.075 mg/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系(r =0.9991),且精密度良好(RSD=0.53%),平均加样回收率为100.13%,RSD为1.18%。结论:该方法简便、快速,是一种价廉快捷测定鸡骨草提取物有效成分含量的好方法。
关键词:鸡骨草提取物;有效成分;酶标法
【Abstract】Objective:To establish a method for the content determination of the effectiveIngredients in extracts from Abrus cantoniensis Hance.Methods:Orthogonal design was used to investigate the enzyme labeled method determination condition in extracts from Abrus cantoniensis Hance.Results:The optimal enzyme labeled method determination condition in extracts from Abrus cantoniensis Hance was the reaction temperature 30 ℃,the wavelength 510 nm and reaction time 12 min.There was a good linear relationship between the quality concentration of rutin and the absorbance in the range of 0.0~0.075 mg/mL(R2=0.9991),and the RSDs of precision test was 0.53%.And the average recovery was 100.13%,RSD=1.18%.Conclusion:The developed method was sensitive and had low detection limit and could be suitable for determining the effective ingredients in extracts from Abrus cantoniensis Hance.
【Key words】Abrus cantoniensis Hance;effective ingredients;enzyme labeled method.
鸡骨草,又名广州相思子(Abrus cantoniensis Hance),为豆科相思子属植物[1]。主要分布于我国广东、广西、福建、海南等地,以全株入药,具有利湿退黄、清热解毒、疏肝止痛等功效,常用于湿热黄疸、胁肋不舒、胃脘胀痛、乳痈肿痛等[1-3]。现代医学研究发现,鸡骨草的主要有效活性成黄酮类物质具抗炎、抗菌、抗病毒、保肝、调节免疫等作用,临床上可用于肝硬化、急慢性肝炎、胆囊炎、外感风热等治疗[4-8]。目前,对黄酮类化合物单体的含量测定主要使用高效液相色谱仪,而对于天然药物的总黄酮类含量的测定多使用紫外分光光度计。本实验拟选用酶标仪对鸡骨草提取物中主要有效活性成黄酮类物质进行含量测定,以期为鸡骨草提取物有效成分含量的测定提供一种简单、快捷、价廉的方法。
1材料和方法
1.1材料与仪器
鸡骨草:市售;芦丁标准品(中国药品生物制品检定所);氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝、无水乙醇等其余试剂为国产分析纯;GZX-9070ME数显鼓风干燥箱(上海博迅实业有限公司医疗设备厂);AR323CN 型电子天平(美国奥豪斯);KQ3200DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);RE-5285A旋转蒸发仪(上海亚荣生化器厂);DZF-6090真空干燥箱(上海精宏实验设备有限公司);600 数显三用恒温水箱(常州澳华);ELX-800多功能酶标仪(美国伯腾仪器有限公司)。
1.2 鸡骨草提取物有效成分的制备
综合文献[9,10]中对鸡骨草有效成分的提取工艺,将干鸡骨草粉碎,过40目筛,得鸡骨草粉末。取
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