生化第十节010.ppt

第十章基因信息的传递;*生物遗传的中心法则;第一节 DNA的生物合成;一、DNA的复制;C ;;（二) 参与DNA复制的物质 1．模板和底物 DNA的合成有严格的模板依赖性，需以解开的DNA单链为模板，指导4种脱氧三磷酸核糖核苷（dNTP）严格按照碱基配对的原则逐一合成新链。 2．引物 由于DNA聚合酶的5′→3′聚合酶活性不能催化将游离的dNTP直接进行聚合以延伸子代链，因此第一个dNTP需添加到已有的寡核苷酸（RNA）的3′-OH末端上，然后再继续延长，这一寡核苷酸被称为引物（primer）。;3．酶和蛋白因子 （1） DNA聚合酶：催化底物dNTP聚合为新生DNA链的酶，称为DNA聚合酶（DNA pol）。由于聚合时需要依赖DNA母链作为模板，故通常称为依赖DNA的DNA聚合酶（DDDP）。在原核及真核生物中均存在着不同类型的DNA聚合酶。;; DNA聚合酶Ⅰ为单链多肽，是一种多功能酶，其酶活性包括： ① 能催化DNA沿5′→3′方向延长，主要用于充填一些DNA短片段间的间隙。 ② 具有3′→5′外切酶的活性，能识别和切除新生子代链中错误配对的核苷酸，起到校读作用。 ③ 5′→3′外切酶活性，可用于切除引物，或切除突变的片段，参与复制或DNA的损伤修复。 ;; 编码DNA聚合酶Ⅱ的基因在DNA损伤时被激活，因此该酶主要参与校读及DNA的损伤修复。 DNA聚合酶Ⅲ是复制时起主要作用的酶，催化反应速度最快。在E. coli中，大多数新生DNA链的合成都是由DNA聚合酶Ⅲ所催化；并且，该酶也具有3’→5’核酸外切酶的活性，能切除错配的核苷酸起到校读作用。;真核生物的DNA聚合酶;不同生物体中各种DNA聚合酶具有共同的特点： ① 以dNTP为底物； ② 合成DNA链具有模板依赖性，严格遵循碱基配对规律； ③ 聚合方向为5′→3′，催化核苷酸以3′,5′-磷酸二酯键相互连接； ④ 均需在引物的3′-OH末端延伸DNA链，而不能从头合成DNA链。;（2） 引物酶：复制是在一段RNA引物的基础上添加脱氧核苷酸而进行聚合的。催化引物合成的酶是一种RNA聚合酶，它不同于催化转录过程的RNA聚合酶，因此被称为引物酶。; ;（3） DNA解旋酶：DNA解旋酶是一类能促进DNA互补双链分离的酶。该酶从复制起始点开始，先解开一小段DNA；每解开一个碱基对，需消耗2分子ATP。双螺旋解开成为单链后，就可作为模板引导DNA新链的合成。从原核生物到人类细胞中大部分解旋酶可沿着模板随着复制叉的延伸而移动。 ;10;解链过程中正超螺旋的形成;拓扑异构酶作用特点 既能水解 、又能连接磷酸二酯键;拓扑异构酶Ⅰ;（5） 单链DNA结合蛋白： 防止单链重新形成双螺旋，保持模板的单链状态以便于复制，同时还可以防止单链模板被核酸酶水解。此外，SSB还具有激活DNA聚合酶的作用。SSB不会沿着复制叉向前移动，而是不断地与模板结合、脱离，反复发挥作用。;;HO;(三) 复制的过程;1、 DNA复制的起始; Dna A;3?;2、 DNA复制的延长;复制过程简图;*冈崎片段：;3、 DNA复制的终止;5?;端粒;端粒酶;*DNA复制的过程;当DNA进行复制时,顺序为5`--TAGA--3`的片段将会产生下列哪一种互补结构?;二、DNA的损伤与修复;（一）引发突变的因素;(二)基因突变的后果及类型;(三) DNA损伤的修复;切除修复;三、逆转录;逆转录酶（RNA指导的DNA聚合酶）;互补DNA;逆转录酶为多功能酶，能催化： ① RNA指导的DNA合成反应； ② RNA的水解反应； ③ DNA指导的DNA合成反应。 在感染病毒的细胞内，逆转录酶催化逆转录的全部反应过程。酶作用需以Zn2+为辅助因子。合成反应也是从5′→3′方向延伸。合成过程需要以病毒本身的一种tRNA作为引物。 ;逆转录的生理意义;第二节 RNA的生物合成（转录）;*DNA复制和转录的区别;一、不对称转录;5′···GCAGTACATGTC ···3′;5? 3?;(二) RNA聚合酶;核心酶;RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合 ;真核生物的RNA聚合酶;(三) 转录的特点;二、 RNA转录的过程;（一）转录的起始;RNA聚合酶 结构基因 终止点;;2、原核生物的转录起始;启动子 结构基因 终止子;模板链（DNA）;（二）转录的延长;模板链（DNA）;E;;转录空泡(transcription bubble)：;;（三）转录的终止;A T P;