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2.固定化酶的反应柱示意图 * 公布分析发财 3.固定化酶在生产实践中的优点 反应柱能连续使用半年,大大降低了生产成本,提高了果糖的产量和质量。 * 公布分析发财 (二)固定化细胞技术 1.将酶或细胞固定化的方法 将酶(或细胞)包埋在细微网格里 将酶(或细胞)相互连接起来 将酶(或细胞)吸附在载体表面上 包埋法 化学结合法 吸附法 * 公布分析发财 2.固定化酶和固定化细胞的联系与区别 联系:应用相同,都能催化某些反应 区别 1)固定化细胞技术操作容易,成本低,容易回收; 2)固定化细胞技术对酶活性影响更小; 3)固定化细胞固定的一系列酶; 4)由于大分子难以通过细胞膜,因此固定化细胞的应用有一定的限制; * 公布分析发财 3.固定化酶和固定化细胞常用的载体材料 明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等, 其共同的特点是不溶于水的多孔性载体 * 公布分析发财 (一)制备固定化酵母细胞 实验操作 1、酵母细胞的活化 2、配制物质的量浓度为0.05mol/L 的CaCl2 3、配制海藻酸钠的溶液 4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 5、固定化酵母细胞 * 公布分析发财 (二)用固定化酵母细胞发酵 实验操作 1、将固定化的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2到3次。 2、将150ml质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到200ml的锥形瓶中,再加入固定好的酵母细胞,置于25摄氏度下发酵24h。 * 公布分析发财 在缺水的状态下,微生物会处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。酵母细胞所需要的活化时间较短,一般需要0.5~1 h,教师需要提前做好准备。此外,酵母细胞活化时体积会变大,因此活化前应该选择体积足够大的容器,以避免酵母细胞的活化液溢出容器外。 (一)酵母细胞的活化 实验操作过程中要注意的下列问题 * 公布分析发财 (二)加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环,涉及到实验的成败,教师一定要提醒学生按照教材的提示进行操作。海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高,将很难形成凝胶珠;如果浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少,影响实验效果。 * 公布分析发财 (三)刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间,以便形成稳定的结构。检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法。一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。 * 公布分析发财 下面是利用固定化酵母细胞发酵生产啤酒的实验过程: 步骤1:酵母细胞的活化。称取lg干酵母置于50mL烧杯中,加l0mL蒸馏水,搅拌,静置1h。 步骤2:配制物质的量浓度为0.05mol/L的氯化钙(CaCl2)溶液。 * 公布分析发财 步骤3:配制海藻酸钠溶液。称取0.7g海藻酸钠置于50mI.烧杯中,加l0mL蒸馏水,由于海藻酸钠在水中溶解速度很慢,所以50mL的烧杯要放在酒精灯上用旺火持续加热,并用玻璃棒搅拌。 步骤4:? 步骤5:固定化酵母细胞。以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的氯化钙(CaCl2)溶液中形成凝胶珠,让凝胶珠在氯化钙(CaCl2)溶液中浸泡30分钟。 * 公布分析发财 步骤6:固定化酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2~3次。 步骤7:将适量的凝胶珠放人500mL锥形瓶中,加300mL已消毒的麦芽汁,封口于25℃下发酵。 (1)步骤4的正确操是: 。 (2)找出上述步骤中的一处错误并改正 (3)步骤6用蒸馏水冲洗2~3次的目的是 (1)在冷却至常温的海藻酸钠溶液中加入活化的酵母细胞,充分混合后转入注射器 洗去杂质(氯化钙)和杂菌,防止污染 * 公布分析发财 酵母细胞的活化 配制CaCl2溶液 配制海藻酸钠溶液 海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 固定化酵母细胞 * 公布分析发财 1.影响实验成败的关键步骤是 2.如果海藻酸钠浓度过低,形成的凝胶珠所包 的酵母细胞数目 3.如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,说明 4.固定化细胞技术一般采用包埋法固定化,原因是 * 公布分析发财 欲通过制备固定化酵母细胞进行葡萄糖溶液发酵实验 该实验小组用如图所示的装置来进 行葡萄糖发酵。 a 是 b 是 ① 从上
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