食品中副溶血性弧菌检测能力验证结果分析.docVIP

精品论文 参考文献 食品中副溶血性弧菌检测能力验证结果分析 陆贞玉 李红梅 贺漓漓 杨小养（广西桂林市疾病预防控制中心 541001） 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2010)31-0032-03 【摘要】 目的 通过参加国家认监委（CNCA）组织开展的B类项目食品中副溶血性弧菌的检测能力认证，以提升本实验室的检测水平。方法 样品的检验标准按照GB/T 4789.7-2008和《食品中副溶血性弧菌检测》（CAN-09-B06）作业指导书进行。结果 本次的检测均获得满意结果，4个冻干样品中，样品109a和样品109c均符合副溶血性弧菌生化特性，检出副溶血性弧菌；样品109b和样品109d 未检出副溶血性弧菌。结论 通过开展实验室能力认证工作，对本中心实验室检测技术的提高和证实自身能力具有积极的作用。 【关键词】 副溶血性弧菌 检测技术 能力验证 能力验证是实验室用户、认可机构和实验室管理部门判定实验室能力的重要技术手段之一，也是实验室内部质量控制技术的有效补充。由于能力验证活动室判定实验室能力的国际通行的做法，其结果得到广泛的承认，对实验室了解、提高和证实自身能力都具有积极作用。疾控机构的微生物检验室是为卫生行政部门制定疾病预防与控制策略及采取措施，为卫生监督提供实验室技术支持，为社会日益增长的卫生需要提供卫生技术服务的检测机构。参加各级能力验证活动,是利用实验室间比对来确定和展示实验室能力的活动，是确保实验室维持较高水平而对其能力进行考核，监督和确认的一种验证活动。通过参加能力验证活动，可以使实验室对其出具数据的可靠性和有效性进行客观评价，也是对实验室内部质量控制程序的一种补充[1]。为此本中心每年都要参加中国合格评定国家实验室认可委员会（CNCA）组织的以及各级实验室间能力比对活动。 2009年本中心参加由广东省疾病预防控制中心负责实施的《CAN-09-B06 食品中副溶血性弧菌检测能力验证》，并取得了满意的结果。现将本次能力验证的检测结果报告如下。 1 样品来源 1.1 2009年7月29日收到由广东省疾病预防控制中心邮寄来的4个冻干样品，实验室代码为109，样品编号分别为：109a、109b、109c和109d。 1.2 按要求对样品进行确认，样品完好无损。 2 材料与采用的标准 2.1培养基和试剂：3%NaCI碱性蛋白胨水（北京陆桥，批号：080606）；TCBS琼脂（北京陆桥，批号：080304）；科玛嘉弧菌显色培养基（郑州博赛，批号930）；3%NaCI胰蛋白胨大豆琼脂（北京陆桥，批号：080621）；3%NaCl三糖铁琼脂（北京陆桥，批号：080530）；氧化酶试剂（生物梅里埃，批号；革兰氏染液（珠海贝索：批号：080130）；盐胨水（杭州天和；080621）；副溶血性弧菌生化鉴定套装（浙江省军区后勤部卫生防疫检验所，批号080830）。 2.2检测依据：GB/T 4789.7-2008《食品微生物学检验 副溶血性弧菌检验》[2]。 2.3参考标准菌种（ATCC 33847） 2.4 仪器设备：电热恒温培养箱，生物显微镜，实时荧光PCR仪。 3 检测 直接划TCBS、科玛嘉弧菌显色平板、血平板 3%NaCl三糖铁 3.1 检测步骤： 样液 直接划TCBS、科玛嘉弧菌显色平板、血平板 3%NaCl三糖铁 生化 3%AP胨水 分别用增菌液20ul划TCBS、科玛嘉弧菌显色平板、血平板 3% NaCl三糖铁 生化 3.2 样品处理：用3% NaCI碱性蛋白胨水1ml溶解冻干粉末，混匀制成悬浊样液。 3.3直接取样各液加入到盛有3ml 3%NaCI碱性蛋白胨水的试管中，36.6℃恒温培养箱中培养18小时（h）,吸取以上菌液20ul于TCBS平板和科玛嘉弧菌显色平板，然后划线分离，36.5℃培养21-22小时（h）TCBS、和血平板上，置于36plusmn;1℃恒温培养箱中培养24小时（h）。经培养后四个样液在上述平板上均无菌落生长。 3.4 增菌：用灭菌吸管吸取0.5ml样液加到盛有3ml3%AP胨水的试管中，置于36plusmn;1℃恒温培养箱8-18h。增菌8h、18h后结果见表1 表1 增菌后生长情况 样品 增菌8h 增菌18h 编号 生长程度 浑浊度 表面菌膜 沉淀