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产丁二酸谷氨酸棒状杆菌基因缺失代谢工程菌株的构建
微生物学通报 May 20, 2013, 40(5): 739−748
Microbiology China © 2013 by Institute of Microbiology, CAS
tongbao@
研究报告
产丁二酸谷氨酸棒状杆菌基因缺失代谢
工程菌株的构建
刘学胜 贾全栋 张伟国*
(江南大学 生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室 江苏 无锡 214122)
摘 要: 【目的】提高谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum) ATCC13032 厌氧条
件下的丁二酸产量, 并降低发酵产物中副产物的含量。【方法】以谷氨酸棒状杆菌
(Corynebacterium glutamicum) ATCC13032 为出发菌, 首先敲除乳酸形成的关键酶乳酸脱
氢酶基因(ldh), 构建 ldh 缺失株谷氨酸棒状杆菌 ATCC13032Δldh; 然后以缺失株谷氨酸
棒状杆菌 ATCC13032Δldh 为出发菌, 敲除该菌的丙酮酸脱氢酶系的 E1p 酶基因(aceE),
构建一株双缺失突变菌株谷氨酸棒状杆菌ATCC13032ΔldhΔaceE 。【结果】与供试菌比较,
谷氨酸棒状杆菌 ATCC13032Δldh 的丁二酸产量和转化率分别提高了94.9%和 32%, 并且
主要的副产物乳酸产量由出发菌产量的 63.5 g/L 降低到很微量的程度。丙酮酸脱氢酶的
失活并不能完全消除副产物乙酸的形成, 但乙酸的产量较ATCC13032Δldh 降低了37.9%,
丁二酸的产量略有提高。【结论】该重组菌具有较强的丁二酸生产工业化潜力, 并且该研
究方法为微生物代谢育种提供参考。
关键词: 谷氨酸棒状杆菌, 丁二酸, 基因敲除, 厌氧转化
*通讯作者：Tel: 86-510 : zhangwg186@163.com
收稿日期：2012-06-21; 接受日期：2012-12-13
740 微生物学通报 Microbiol. China 2013, Vol.40, No.5
Construction a metabolic engineering strain to produce
succinic acid from Corynebacterium glutamicum
by gene deletion mutation
*
LIU Xue-Sheng JIA Quan-Dong ZHANG Wei-Guo
(Key Laboratory of Industrial Biotechnology of the Ministry of Education , School of Biotechnology,
Jiangnan University , Wuxi, Jiangsu 214122, China)
Abstract: [Objective] In order to improve the production
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