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第25章 病毒感染的检查方法和防治原则 Examination and Strategy of Prevention and Therapy for Viral Infection;第一节 病毒感染的检查方法 一、标本的采集和送检 用于分离病毒或检测其核酸的标本，应采集急性期标本，要根据感染部位采集标本，应严格注意无菌操作。由于病毒在室温中很易被灭活，应在采集和运送标本中注意冷藏。; ;二、病毒分离培养的方法 1. 动物animals接种：如鼠、兔、犬、牛和猴等。 2. 鸡胚chicken embryo接种：针对有些病毒，如流感病毒、痘病毒。 3. 细胞cell culture培养：有三种类型的细胞。 Isolation and identification of viruses in the lab is Gold standard for diagnosis. ;（1）细胞类型 ①原代细胞Primary cell culture ：对多种病毒的易感性高，主要用于从标本中分离病毒。 ②传代细胞Continuous passage cell line ：是指可在体外连续传代的细胞。大多数来自肿瘤组织或二倍体细胞，如Hela细胞或自发转化的原代细胞系，如中国地鼠卵巢细胞（CHO）。这些细胞系的染色体与正常细胞不同，为多倍体。 ③二倍体细胞Diploid cell line ：则为在体外连续传代50～100代后，仍保持其二倍染色体数目的细胞。;(三)病毒的鉴定;（4）病毒定量方法 空斑形成单位（plaque forming unit, PFU）：测定病毒数量可用空斑形成单位。一个空斑是标本中一个病毒大量复制所致，有感染性的病毒经适当稀释后接种于单层细胞，由于单个病毒的复制增殖使局部单层细胞脱落，此即空斑。 50％组织细胞感染量（TCID50） 红细胞凝集试验 ;;三、病毒感染的血清学诊断 采用免疫标记技术，即用荧光素、同位素、生物素和酶等标记已知的特异性抗体，用于检测病毒感染局部脱落细胞或分泌物细胞中的抗原，来早期诊断病原。 机体血清中出现抗某种病毒的抗体，除患过相应的疾病外，亦可因隐性感染或疫苗接种而产生。因此，抗体效价必须明显高于正常人群的水平或随病程递增才有诊断价值。; ; ;第二节 病毒感染的防治原则 一、病毒感染的预防 1. 人工主动免疫 病毒疫苗可分成传统疫苗和新型疫苗两类。 传统疫苗：灭活疫苗、减毒活疫苗和亚单位疫苗等。 新型疫苗：主要指基因工程技术???产的疫苗，包括基因工程亚单位疫苗、基因工程载体疫苗、核酸疫苗等。;灭活疫苗：乙脑疫苗、狂犬疫苗、流感灭活疫苗、HAV和HBV疫苗等。 减毒活疫苗：脊髓灰质炎疫苗、麻疹疫苗、HAV疫苗、腮腺炎疫苗、风疹疫苗等。;2. 人工被动免疫 常用的人工被动免疫制剂有免疫血清、胎盘球蛋白、丙种球蛋白，以及与细胞免疫有关的转移因子等。 administration of specific antibody, purified immunoglobulin or cytokins to allow the body to acquire the specific immunity immediately.;二、病毒感染的治疗 1. 核苷类药物 2. 病毒蛋白酶的抑制物 3. 干扰素或干扰素诱生剂 4. 抗病毒基因治疗 5. 免疫制剂 6. 中草药 ;（一）抗病毒化学制剂 1. 核苷类药物 疱疹净（IDU） (2)阿昔洛韦（acyclovir, ACV）和丙氧鸟苷(acyclovir,ACV) 是目前最有效的抗疱疹病毒药物之一. 机制： 竞争病毒DNA复制酶 (3) 拉米呋定(lamivudine) ： 抑制慢性乙型肝炎患者体内HBV的复制。 机制：抑制病毒逆转录酶 (4)病毒唑： 抑制DNA和RNA病毒复制。 流感病毒、呼吸道合胞病毒的治疗;2. 非核苷类反转录酶抑制剂 nevirapine是第一个新合成的非核苷类反转录酶抑制剂，1996年获准用于治疗HIV 3. 蛋白酶抑制剂 ： 英迪纳瓦(indinavir)是1996年批准的新一代蛋白酶抑制剂，用于HIV. 4. 其他抗病毒药物 ： 金刚烷胺能阻止脱壳，主要用于治疗甲型流感。 ;(二)干扰素和干扰素诱生剂的应用 1． 干扰素(IFN) 2． IFN诱生剂: polyI:C、甘草甜素、芸芝多糖等 （三） 中草药防治病毒感染 ： 板蓝根、黄芪、大青叶等 （四） 基因治疗(gene therapy) ： 目前还处于研究阶段 (1)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide, asON) 人工合成