黄芪多糖对大鼠原代成骨细胞的影响及其机制研究.PDFVIP

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 10 期 2011 年 10 月 ·2065 · 黄芪多糖对大鼠原代成骨细胞的影响及其机制研究 1 1 1 1 1, 2* 孔祥鹤 ，牛银波 ，王婷梅 ，王 娟 ，梅其炳 1. 西北工业大学生命学院，陕西 西安 710072 2. 第四军医大学 药理教研室，陕西 西安 710032 摘 要：目的 研究黄芪多糖对体外培养大鼠原代成骨细胞增殖、分化及矿化的影响及其作用机制。方法 体外培养的新生 SD 大鼠颅骨原代成骨细胞体系中分别加入不同质量浓度（0.1、0.3、1、3、10、30、100 μg/mL ）的黄芪多糖，24 、48 h 后 MTT 法检测细胞增殖，碱性磷酸酶（AKP ）活性检测法检测细胞分化，茜素红染色法观察黄芪多糖 10 μg/mL 对细胞矿化的 影响，Western blotting 法检测黄芪多糖 1、10 μg/mL 作用于细胞 24 h 后，对细胞中骨形成蛋白（BMP-2 ）的表达、MAPK 信号通路中关键蛋白 ERK 、P38 、p-ERK 、p-P38 等表达的影响。结果 黄芪多糖能剂量相关地促进大鼠原代成骨细胞的增 殖、分化及矿化，同时上调 BMP-2 、p-ERK 、p-P38 蛋白的表达，提高 p-ERK/ERK 、p-P38/P38 值。结论 黄芪多糖可通过 促进 BMP-2 的表达、上调其下游的ERK MAPK 和 P38 MAPK 的磷酸化水平来促进成骨细胞增殖、分化。 关键词：黄芪多糖；原代成骨细胞；增殖；分化；矿化；BMP-2 ；MAPK 中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2011)10 - 2065 - 05 Effect of Astragalus polysaccharides on rat primary osteoblast and its mechanism 1 1 1 1 1, 2 KONG Xiang-he , NIU Yin-bo , WANG Ting-mei , WANG Juan , MEI Qi-bing 1. School of Life Sciences, Northwestern Polytechnical University, Xi’an 710072, China 2. Department of Pharmacology, Fourth Military Medical University, Xi’an 710032, China Key words: Astragalus polysaccharides; primary osteoblast; proliferation; differentiation; mineralization; BMP-2; MAPK 骨质疏松症是一种全身性的骨骼老化或废用退 《神农本草经》将其列为上品。中医临床常用含有黄 化相关的代谢障碍性疾病，其防治主要从促骨形成 芪的方剂、黄芪水煎液等治疗骨质疏松症[3] ，然而 与抑骨吸收两方面入手。研究表明，骨形态发生蛋 对其抗骨质疏松症作用的活性部位、作用机制尚不 白（bone morphogenetic proteins ，BMP ）对胚胎骨 清楚。黄芪多糖是黄芪的主要活性成分之一，具有 形成及出生后成骨有重要作用，在体外能诱导成骨 免疫调节、保护心肌、降血糖、延缓衰老等多种药 细胞分化。BMP-2 是最主要的骨形成调控因子，通 理作用[4-7] 。因此本实验研究黄芪多糖对大鼠原代成 过一系列信号转导途径，其中包括较为重要的促分 骨细胞增殖、分化及矿化能力的影响，探讨其是否 裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase ， 影响 BMP-2 、MAPK 信号通路相关蛋白的表达，以