徐锡金《细胞学》汕头大学：细胞分化5.pptVIP

思考题 1.细胞转分化、去分化的条件和生物医学意义。 2.细胞决定的概念、机制及其与细胞分化的关系。 3.为什么说细胞分化的本质是基因组中不同基因的选择性表达。 4.细胞分化主导基因、组合基因调控及远距离调控在细胞分化中的作用。 5.染色质共价修饰的机制及其与细胞分化的关系。 6.非编码RNA的种类及其在细胞分化中的作用。 7.细胞分化的影响因素及其机制。 8.如何从细胞分化角度理解肿瘤的发生。 9.再生的机制和医学意义。 （2）组合调控—— 一些基因调节蛋白 的组合能产生许多 类型细胞 （三）染色质成分的共价修饰制约基因的转录 1. DNA的甲基化 2. 组蛋白的乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化、 糖基化和羰基化 DNA和组蛋白的修饰都会引起染色质结构和基因转录活性的变化。染色质成分的共价修饰在基因转录调控上的作用是可遗传的。 1. DNA甲基化在转录水平上调控细胞分化的基因表达 ① DNA甲基化概念 分布：常见于富含CG二核苷酸的CpG岛，主要集中于异染色质区，其余则散在于基因组中。 在甲基转移酶催化下，DNA分子中的胞嘧啶可转变成5-甲基胞嘧啶，这称为DNA甲基化。 含量：哺乳动物基因组中约70%～80%的CpG位点是甲基化的。 作用：DNA的甲基化位点阻碍转录因子结合，甲基化程度越高，DNA转录活性越低。 人类胚胎红细胞中珠蛋白基因的甲基化 甲基化（DNA methylation）能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变，从而控制基因表达。 ）在甲基转移酶的催化下，DNA的CG两个核苷酸的胞嘧啶被选择性地添加甲基，形成5－甲基胞嘧啶，这常见于基因的5-CG-3序列。大多数脊椎动物基因组DNA都有少量的甲基化胞嘧啶，主要集中在基因5＇端的非编码区，并成簇存在。甲基化位点可随DNA的复制而遗传，因为DNA复制后，甲基化酶可将新合成的未甲基化的位点进行甲基化。DNA的甲基化可引起基因的失活。 DNA甲基化主要形成5－甲基胞嘧啶（5-mC）和少量的N6-甲基嘌呤（N6-mA）及7－甲基鸟嘌呤（7-mG） 结构基因含有很多CpG 结构, 2CpG 和2GPC 中两个胞嘧啶的5 位碳原子通常被甲基化, 且两个甲基集团在DNA 双链大沟中呈特定三维结构。基因组中60%～ 90% 的CpG 都被甲基化, 未甲基化的CpG 成簇地组成CpG 岛, 位于结构基因启动子的核心序列和转录起始点。有实验证明超甲基化阻遏转录的进行。DNA 甲基化可引起基因组中相应区域染色质结构变化, 使DNA 失去核酶ouml;限制性内切酶的切割位点, 以及DNA 酶的敏感位点, 使染色质高度螺旋化, 凝缩成团, 失去转录活性。5 位C 甲基化的胞嘧啶脱氨基生成胸腺嘧啶, 由此可能导致基因置换突变, 发生碱基错配: T2G, 如果在细胞分裂过程中不被纠正,就会诱发遗传病或癌症, 而且, 生物体甲基化的方式是稳定的, 可遗传的。 （1）甲基化直接干扰转录因子与启动子中特定的结 合位点的结合； （2）甲基化引起基因沉默可能是有特异的转录抑制 因子直接与甲基化DNA结合引起； （3）染色质结构的改变。 ② DNA 甲基化导致基因失活/沉默的可能机制 2. 组蛋白的乙酰化和去乙酰化影响 转录因子与DNA的结合 组蛋白中被修饰氨基酸的种类、位置和修饰类型被称为组蛋白密码（histone code），它决定了染色质转录活跃或沉默的状态。 组蛋白乙酰化：在组蛋白乙酰基转移酶作用下，于组蛋白N-端尾部的赖氨酸加上乙酰基。 乙酰化的作用：在大多数情况下，组蛋白乙酰化有利于基因转录。低乙酰化的组蛋白通常位于非转录活性的常染色质区域或异染色质区域。 （四）同源异形框基因规划机体 前—后体轴结构分化与发育蓝图 广泛存在于从酵母到人类的各种真核生物中的基因，其特点是基因中存在共同的180bp的DNA片段，编码高度同源的60个氨基酸。这个共同的180bp DNA片段被称为同源异形框，含有同源异形框的基因谓之同源异形框基因，如果蝇的HOM 基因，动物和人类的Hox基因。 是含有同源异形框的基因编码 DNA结合蛋白，调控基因的表达和控制器官发生与细胞分化。 1. 同源异形框基因 （homeobox gene） ： 2. 同源异形域蛋白（homeodomain protein）： 不同生物同源异形框编码的氨基酸序列比较 高度保守的60个氨基酸片段，为一种螺旋-环-螺旋结构，其中的9个氨基酸（第42～50位）与DNA的大沟相结合，能识别其所控制的基因启动子中的特异序列，引起特定基因表达的激活或阻抑。 3. 同源异形框基因的结构