第二章节染色体与DNA.ppt

基因组复制与细胞分裂的关系 细胞在每次分裂的过程中，整个基因组都必须精确地复制一次。 如何保证这一点？两个原则 (1) DNA复制的启动决定了细胞的进一步分裂; (2) 复制过程完成前，细胞是不会发生分裂的。 DNA dependent DNA polymerase——DDDP DNA dependent RNA polymerase——DDRP RNA dependent RNA polymerase——RDRP RNA dependent DNA polymerase——RDDP 质粒一般是一个自主环状的DNA基因组，构成一个独立复制子； 原核生物基因组中一般只含一个复制子，在唯一的起始点启动就会引起整个基因组复制； 真核生物基因组含多个复制子（一般40-100kb/个）。 注：在每个细胞周期中，每个复制子发生一次复制，且只发生一次。 复制眼概念 复制叉移动方向的确定 3 DNA复制的几种形式 3.1 线性DNA双链的复制 3.2 环状DNA双链的复制 3.1 线性DNA双链的复制 3.1.1 线性DNA复制的具体表现 3.1.2 线性DNA复制时末端问题的提出 3.1.3 线性DNA复制时末端问题的解决方案 DNA复制的一般过程 DNA双螺旋走向是5′→3′, 3′→5′方向，DNA聚合酶只能催化DNA从5′→3′的方向合成。在以3′→5′方向的母链为模板时，复制合成出一条5′→3′方向的前导链(leading strand)，前进方向与复制叉打开方向是一致的，因此前导链的合成是连续进行的。 3.1.1 线性DNA复制的具体表现 3.1.2 线性DNA复制时末端问题的提出 3.1.3 线性DNA复制时末端问题的解决方案 (1）通过将线性复制子转变为环状或多聚分子。如T4和λ噬菌体：滚环产生多聚复制子）； (2）某种蛋白质可能会介入，在真正的末端上启动。几种线性病毒核酸具有与5`端碱基共价结合的蛋白质，其中了解最清楚的例子是腺病毒（adenovirus ）DNA，φ29噬菌体DNA和脊髓灰质炎病毒RNA)。 (3）DNA可形成特殊的结构，如在末端形成发夹。使分子没有游离末端。草履虫（Paramecium）的线性线粒体DNA的复制中就形成了一种交联； (4）末端是可变的，而不是精确确定的。真核生物染色体可能采用这种方式，在这种情况下，DNA末端的短重复序列的拷贝数改变（如端粒的复制）； 3. 2 环状DNA的复制 3.2.1 θ-复制 replication by θ-structure E.coli复制的起始 在原点链分开起始。 DnaA 单体结合在9bp重复位置，然后链弯曲,DnaA与13bp重复位置结合，DNA链在13bp重复位置分开，DnaB/DnaC加入进复合体，形成复制叉。 ΦⅩ174滚环复制的起始区含有30nt的保守顺序，构成A蛋白的识别位点、结合位点和A-T丰富区。 A蛋白由ΦⅩ174自己编码。 A蛋白识别Ori的特殊序列后诱导A-T丰富区的解链，并在正链的第4305－4306nt之间切断磷酸二酯键，产生3’－OH和5’－P，A蛋白的Tye的－OH与5’端的nt(A)形成磷酸脂链，结合于上。 成环滚环 新环为单链环 滚环复制，成多聚体，再切割 成环，新环为双链环 原核生物DNA复制的基本过程 多种方法可以产生3`端 原核生物DNA复制的基本过程 DNA合成包括：起始、延伸和终止三个阶段 起始(initiation)：涉及一种蛋白质复合物，它识别复制起始点(origin)。在DNA合成之前，母链必须分开，并（短暂地）保持单链状态，然后在复制叉处起始子链的合成； 延伸(elongation)：由另一个蛋白质复合体完成。只有当蛋白质复合体和DNA在复制处的特殊结构结合时，复制体(replisome)才存在，在复制体延DNA移动时，母链分开而子链合成； 终止（termination)：在复制子末端，终止反应是必需的。终止后，加倍的染色体必须分开。 真核生物由不同DNA聚合酶分别负责起始和延伸 三种细胞核DNA复制酶具有不同的功能: DNA polymerase α 起始新链合成 DNA polymerase δ 延伸先导链 DNA polymerase ε 可能与后随链合成有关，也可能具有其他功能 Nature：科学家用大肠杆菌创造出“遗传时钟” 美国科学家在一项最新研究中，利用合成生物学方法，成功创造出了首个稳定、快速、可调的“遗传时钟”，它通过单个大肠杆菌细胞内部的荧光蛋白闪烁来计时。 由于该时钟的闪烁速率会随着温度和能量源等环境条件改变，因此新成果有望为可感知环境信息的