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RASSF1A基因对人胃癌SGC-7901细胞迁移侵袭影响研究生：徐艳清导师：廖爱军教授中文摘要目的：探讨RASSF1A 基因对人胃癌SGC-7901 细胞迁移侵袭的影响及其分子机制。方法：采用瞬时转染法转染RASSF1A基因后，利用RT-PCR及WesternBlot 分别检测RASSF1A 基因在人胃癌SGC-7901 细胞中的mRNA及蛋白表达，验证转染效果；细胞划痕实验、Transwell 侵袭小室实验分别观察转染RASSF1A基因前后人胃癌SGC-7901细胞迁移与侵袭能力的变化，WesternBlot检测转染RASSF1A基因前后人胃癌SGC-7901 细胞E-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达的变化。结果：人胃癌SGC-7901细胞通过瞬时转染RASSF1A基因后，RT-PCR及Western Blot结果发现，与未转染质粒组及pcDNA3.1(+)空质粒转染组相比，转染pcDNA3.1(+)-RASSF1A 质粒组RASSF1A 基因mRNA及蛋白呈高表达，差异有统计学意义（P0.05），提示RASSF1A 基因被成功转染至人胃癌SGC-7901 细胞；随后，划痕实验显示，与未转染质粒组及pcDNA3.1(+)空质粒转染组相比，转染pcDNA3.1(+)-RASSF1A 质粒组细胞迁移率明显降低，差异有统计学意义（P0.05），而未转染质粒组及pcDNA3.1(+)空质粒转染组相比，差异无统计学意义（P0.05），表明RASSF1A基因可抑制人胃癌SGC7-901 细胞迁移能力；Transwell 侵袭小室实验表明，转染pcDNA3.1(+)-RASSF1A 质粒组穿膜细胞数量较对照组明显减少（P0.05），提示转染RASSF1A 基因组细胞侵袭能力减弱，而未转染质粒组及pcDNA3.1(+)空质粒转染组相比，差异无明显变化（P0.05）。WesternBlot结果显示，与未转染质粒组及pcDNA3.1(+)空质粒转染组相比，转染pcDNA3.1(+)-RASSF1A质粒组中上皮标志物E-cadherin蛋白表达呈上升趋势，间质标志物Vimentin及转录因子Snail蛋白的表达呈下降趋势（P0.05），而未2转染质粒组与pcDNA3.1(+)空质粒转染组相比，差异无统计学意义（P0.05），提示RASSF1A 基因可抑制人胃癌SGC-7901 细胞EMT的发生。结论：RASSF1A 基因可抑制人胃癌SGC-7901 细胞迁移侵袭，其机制可能与RASSF1A基因下调转录因子Snail的表达，从而抑制人胃癌SGC-7901 细胞上皮间质转化的发生相关。关键词：RASSF1A 基因；SGC-7901；Snail；上皮间质转化；迁移侵袭3EffectofRASSF1AgeneonmigrationandinvasioninhumangastriccancerSGC-7901cellsAbstractObjective:TheaimofthisstudyistoinvestigatetheinfluenceofRASSF1Agene onmigrationandinvasionanditsmolecularmechanisminhumangastriccarcinoma cell lineSGC-7901.Methods:Thetransienttransfectionmethodisusedtotransfecthumangastric cancerSGC-7901cells,forverifyingthetransfectioneffect，RT-PCRandWestern BlotareusedtodetecttheexpressionofRASSF1Ageneaftertransfecting48hours.ThroughcellscratchexperimentandTranswellinvasionexperiment discuss migrationandinvasioninhumangastriccarcinomacelllineSGC-7901transfected RASSF1Ageneornot,respectively.Forfurtherstudy,WesternBlotisemployedto observedtheexpressionofE-cadherin,VimentinandSnailproteininhumangastric carcinomacell lineSGC-7901 transfected RASSF1A geneornot.Results:RT-PCRandWesternBlotshowedthatthemRNAandproteinofRASS