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rassf1a基因对人胃癌sgc-7901细胞迁移侵袭影响word论文
RASSF1A基因对人胃癌SGC-7901细胞迁移侵袭影响研究生:徐艳清导师:廖爱军教授中文摘要目的:探讨RASSF1A 基因对人胃癌SGC-7901 细胞迁移侵袭的影响及其分子机制。方法:采用瞬时转染法转染RASSF1A基因后,利用RT-PCR及WesternBlot 分别检测RASSF1A 基因在人胃癌SGC-7901 细胞中的mRNA及蛋白表达,验证转染效果;细胞划痕实验、Transwell 侵袭小室实验分别观察转染RASSF1A基因前后人胃癌SGC-7901细胞迁移与侵袭能力的变化,WesternBlot检测转染RASSF1A基因前后人胃癌SGC-7901 细胞E-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达的变化。结果:人胃癌SGC-7901细胞通过瞬时转染RASSF1A基因后,RT-PCR及Western Blot结果发现,与未转染质粒组及pcDNA3.1(+)空质粒转染组相比,转染pcDNA3.1(+)-RASSF1A 质粒组RASSF1A 基因mRNA及蛋白呈高表达,差异有统计学意义(P0.05),提示RASSF1A 基因被成功转染至人胃癌SGC-7901 细胞;随后,划痕实验显示,与未转染质粒组及pcDNA3.1(+)空质粒转染组相比,转染pcDNA3.1(+)-RASSF1A 质粒组细胞迁移率明显降低,差异有统计学意义(P0.05),而未转染质粒组及pcDNA3.1(+)空质粒转染组相比,差异无统计学意义(P0.05),表明RASSF1A基因可抑制人胃癌SGC7-901 细胞迁移能力;Transwell 侵袭小室实验表明,转染pcDNA3.1(+)-RASSF1A 质粒组穿膜细胞数量较对照组明显减少(P0.05),提示转染RASSF1A 基因组细胞侵袭能力减弱,而未转染质粒组及pcDNA3.1(+)空质粒转染组相比,差异无明显变化(P0.05)。WesternBlot结果显示,与未转染质粒组及pcDNA3.1(+)空质粒转染组相比,转染pcDNA3.1(+)-RASSF1A质粒组中上皮标志物E-cadherin蛋白表达呈上升趋势,间质标志物Vimentin及转录因子Snail蛋白的表达呈下降趋势(P0.05),而未2转染质粒组与pcDNA3.1(+)空质粒转染组相比,差异无统计学意义(P0.05),提示RASSF1A 基因可抑制人胃癌SGC-7901 细胞EMT的发生。结论:RASSF1A 基因可抑制人胃癌SGC-7901 细胞迁移侵袭,其机制可能与RASSF1A基因下调转录因子Snail的表达,从而抑制人胃癌SGC-7901 细胞上皮间质转化的发生相关。关键词:RASSF1A 基因;SGC-7901;Snail;上皮间质转化;迁移侵袭3EffectofRASSF1AgeneonmigrationandinvasioninhumangastriccancerSGC-7901cellsAbstractObjective:TheaimofthisstudyistoinvestigatetheinfluenceofRASSF1Agene onmigrationandinvasionanditsmolecularmechanisminhumangastriccarcinoma cell lineSGC-7901.Methods:Thetransienttransfectionmethodisusedtotransfecthumangastric cancerSGC-7901cells,forverifyingthetransfectioneffect,RT-PCRandWestern BlotareusedtodetecttheexpressionofRASSF1Ageneaftertransfecting48hours.ThroughcellscratchexperimentandTranswellinvasionexperiment discuss migrationandinvasioninhumangastriccarcinomacelllineSGC-7901transfected RASSF1Ageneornot,respectively.Forfurtherstudy,WesternBlotisemployedto observedtheexpressionofE-cadherin,VimentinandSnailproteininhumangastric carcinomacell lineSGC-7901 transfected RASSF1A geneornot.Results:RT-PCRandWesternBlotshowedthatthemRNAandproteinofRASS
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