生产控制区域环境、人员卫生微生物检测及验证作业指导书.docVIP

稳健医疗集团有限公司 生产控制区域环境、人员卫生微生物检测及验证作业指导书 文件编号 WN-QM-P28-SOP15 版 次 A/0 生效日期 2009-9-29 页 次 1/4 1.目的 为了有效控制本集团所有公司的生产环境,指导对生产控制区域环境、人员等进行微生物检测和验证。 2.适用范围 本集团所有公司生产控制区域（包括化验室无菌间）的空气、与产品直接接触的设施（台面、容器、模具、防护工具、工衣等）和人员。 3.职责 由质量部部负责制定,品管部和生产部实施，其它部门配合。 4.工作程序 4.1 检测项目：生产控制区域空气中沉降菌菌落总数、浮游菌总数，与产品直接接触的设施表面和生产人员手的菌落总数。 4.1.1生产车间环境 按YY0033—2000标准中相关规定每天上午、下午对室内温、湿度进行测定，室温标准18～28℃，相对湿度为45～65%。(化验室无菌间的环境:室温标准20±2℃，相对湿度为60%±5%) 4.1.2检测方法及相关规定(化验室无菌间的环境检测参照4.1.2.1和4.1.2.2) 空气中沉降菌菌落总数和浮游菌菌落总数测试要求: 测试前净化空调系统正常运行不少于30分钟后开始。被测洁净室（区）的温、湿度需达到规定的要求，压差必须控制在规定值内. 测试分静态和动态，测试状态的选择必须符合生产的要求，并在报告中注明测试状态。测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服，静态测试时，室内测试人员不得多于二人。 4.1.2.1空气中沉降菌菌落总数的测定（采用平板暴露法）： 4.1.2.1.1采样前准备: 在采样前应检查所有试验的营养琼脂培养基平皿,如发现有变质、破损、或污染培养基应剔除，检查无污染后方能使用。 4.1.2.1.2测试: 采样点距墙1M；高度应在0.8M-1.5m处采样，采样点数见附表1，采样时，打开含营养琼脂的平皿（直径 9CM）皿盖，按上述采样点与高度布放，暴露30分钟后立即关盖。将已采集的培养基在1小时内送实验室,送检中平板不得开启，并要密封好。 4.1.2.1.2培养: 在30～35℃培养不少于48小时后观察结果,求出所有采样点的平均菌落数(结果判定见附表2) 每批培养基均应有对照试验,每批选3只培养基皿3个放置作对照试验. 4.1.2.2空气中浮游菌总数的测定(用离心式空气微生物采样器法)： 4.1.2.2.1采样前准备: 在采样前应检查琼脂条有无污染,如发现污染应剔除，检查无污染后方能使用。测试前均应对采样器的顶盖、转盘、以及罩子的内外面进行消毒，采样完后均应重新消毒。 4.1.2.2.2测试: 将无污染的琼脂条测试面朝下，插入灭菌的涡壳中并用已消毒的盖密封好。室内面积＜100M2采2个点,≥100-＜200M2取3个点, ≥200-＜400M2,采4个点 , ≥400MM2取5个点. 高度在0.8-1.5米处,采样时,采样器应与人员保持一定距离并避免与物品接触太近。 设置时间和高度后,按下启动开关,采样器开始采样,时间到后采样器自动停止采样,抽出琼脂条放入琼脂条外壳中,用胶带纸将外壳开口处封好。作好标示（如日期、采样区域等），将采集好的培养基1小时内送检, 送 拟制 审核 批准 稳健医疗集团有限公司 生产控制区域环境、人员卫生微生物检测及验证作业指导书 文件编号 WN-QM-P28-SOP15 版 次 A/0 生效日期 2009-9-29 页 次 2/4 检中不得开启。 4.1.2.2.3培养: 于30-35℃培养不少于48小时后观察结果,算出34个小方格内的菌落数并计算空气中的微生物的数量（琼脂条必须避光、并在2-15℃下储藏）。每批选1个琼脂条放置作对照试验(结果判定见附表2) 计算公式如下: 琼脂条上的菌落数×25 空气浮游菌菌落总数＝------------------------ (CFU)/M3 采样时间(分) 4.1.2.3与产品直接接触的设施表面菌落总数的检测： 将经灭菌的内径为5X5CM灭菌规格板放在被检物表面,根据被检物表面积大小,采平行样1-4个，用浸有灭菌生理盐水的棉签，在规格板内涂抹10次(往返计1次)，然后剪去手接触部分棉棒,将棉签放入含10ML灭菌生理盐水的采样管中送检. 将每支采样管混匀（在震荡器上震荡两分钟或拍打80次）。10倍递减稀释，对每个稀释度(取3个稀释度)，分别取1ML放于灭菌平皿内(每个稀释度倾注2块平皿),用普通营养琼脂培养基作倾注培养。置37℃恒温培养24—48小时，观察