微生物絮凝剂产生菌的筛选-鉴定及絮凝试验.docVIP

微生物絮凝剂产生菌的筛选\鉴定及絮凝试验 　　摘要：从武汉市某印染厂活性污泥中分离出１７株具有絮凝活性的菌株，复筛后得到１株较高絮凝活性菌，命名为ｆｄ２０。采用全自动细菌鉴定系统Ｖｉｔｃｋ－３２进行生化特征鉴定，初步鉴定该菌株为少动鞘氨醇单胞菌。对该菌的絮凝条件进行了优化，结果表明，加入０．６ｍＬ的１％ＣａＣｌ２或絮凝菌液投加量为０．１ ｍＬ时，该菌株对高岭土悬浊液的絮凝率可达９３％以上。 　　关键词：微生物絮凝剂；菌株；筛选；鉴定；絮凝优化 　　中图分类号：Ｘ７０３．５文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11401－0066-03 　　 　　Screening, Identification and Preliminary Experiment of High-efficiency 　　Bioflocculant-producing Bacteria 　　 　　ＺＨＡＮＧ Ｄｏｎｇ，ＸＩＡＮＧ Ｙａｎ－ｌｉ，ＰＥＮＧ Ｑｉ－ａｎ，ＺＨＡＮＧ Ｘｕｅ－ｊｉａｏ，ＳＨＩ Ｌｕ－ｌｕ，ＬＩＵ Ｌｉｎ－ｂｏ 　　 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： １７ bioflocculant－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｂａｃｔｅｒｉａ ｗｅｒｅ ｓｃｒｅｅｎｅｄ ｆｒｏｍ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｓｌｕｄｇｅ ｆｒｏｍ ｏｕｔｆａｌｌ ｏｆ ａ ｐｒｉｎｔｉｎｇ ａｎｄ ｄｙｅｉｎｇ mill． Ａｆｔｅｒ ｒｅｓｃｒｅｅｎｉｎｇ， ａ ｓｔｒａｉｎ ｗｉｔｈ ｈｉｇｈｅｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｗａｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ． Ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ａｕｔｏｍａｔｅｄ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ， Ｖｉｔcｋ－３２， ｔｈｉｓ ｓｔｒａｉｎ ｗａｓ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ａｓ Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ Ｐａｕｃｉｍｏｂｉｌｉｓ． Ｔｈｅ ｆｌｏｃｃｕｌａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｈｉｓ ｓｔｒａｉｎ ｔｏ ｋａｏｌｉｎ ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ ｗａｓ ａｂｏｖｅ ９３％ ｗｈｅｎ ０．６ｍＬ ｏｆ １％ ＣａＣｌ２ ｏｒ ０．１ｍＬ ｂａｃｉｌｌｉ ｗａｓ ａｄｄｅｄ ｉｎ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｂｉｏｆｌｏｃｃｕｌａｎｔ； ｂａｃｔｅｒｉａ； ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ； ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ； ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｆｌｏｃｃｕｌａｔｉｏｎ 　　 　　絮凝剂是一种广泛应用于水处理的助剂，可使水中不易沉淀的固体悬浮颗粒凝聚沉降。目前应用的絮凝剂存在易产生二次污染、有毒害作用的缺点；天然生物高分子絮凝剂具有良好的絮凝沉淀性能，且安全、无毒、可生物降解，对生态环境不会产生危害，具有广阔的发展前景［１］。国外微生物絮凝剂于２０世纪９０年代开始商业化［２］；我国对生物絮凝剂的研究起始于２０世纪９０年代，目前多数研究处于菌种的筛选阶段［３］。原材料价格高、絮凝剂产量低、研究水平低等是阻碍絮凝剂实现产品化的主要因素。 　　本课题组从武汉市某印染厂排污口的活性污泥中分离出具有絮凝活性的微生物菌株，对其进行了生化鉴定和絮凝条件的优化研究，现将结果报告如下。 　　１材料与方法 　　１．１材料 　　１．１．１菌种采集菌种来源于武汉市某印染厂排污口的活性污泥中。 　　１．１．２菌种培养基筛选培养基：葡萄糖２．０0，ＫＨ２ＰＯ４ ０．２0，Ｋ２ＨＰＯ４ ０．２0，２ＳＯ４ ０．０２，ＮａＣｌ ０．０１，脲０．０５，酵母膏０．０５，ＭｇＳＯ４７Ｈ２Ｏ ０．０２，琼脂粉２．０0。发酵培养基：葡萄糖２．０0，ＫＨ２ＰＯ４ ０．２0，Ｋ２ＨＰＯ４ ０．２0，２ＳＯ４ ０．０２，ＮａＣｌ ０．０１，脲０．０５，酵母膏０．０５，ＭｇＳＯ４ ０．０２。 　　１．１．３主要试剂及仪器高岭土、氯化钙、摇床、恒温培养箱、Ｖｉｔｅｋ－３２全自动细菌鉴定系统。 　　１．２方法 　　１．２．１絮凝检测方法高岭土悬浊液：４ ｇ高岭土溶于１ ０００ ｍＬ去离子水中，快速搅拌５ ｍｉｎ，备用。助凝剂：１ｇ ＣａＣｌ２溶于１００ ｍＬ去离子水中得到１％的ＣａＣｌ２溶液。 　　取一支洁净试管，加入１０ ｍＬ高岭土溶液、０．６ ｍＬ ＣａＣｌ２溶液、０．５ ｍＬ的菌液，另取一试管加入相同体积的空白培养基、１０ ｍＬ高岭土溶液、０．６ｍＬ ＣａＣｌ２溶液，用塞子塞好。将试管上下快速颠倒１０次，再慢速颠倒１０次，静置３ ｍｉｎ。取上述静置后的上清液进行吸光度测定，以空白培养基为对照。 　　絮凝活性用絮凝率来表示，絮凝率＝／Ａ×１００％；式中，Ａ为对照上清液在５５０ ｎｍ处的光密度值；Ｂ为絮凝处理后的上清液在５５０ ｎｍ处的光密度值［4］。 　　１．２．２絮凝剂产生菌的分离将污泥样品稀释，取１０－１、１０－２、１０－３、１０－４、１０