分子生物学3-2基因与基因组的结构和功能.ppt

构成断裂基因的DNA序列被分为两类： 基因中编码的序列称为外显子(exon)，外显子是基因中对应于信使RNA序列的区域； 不编码的间隔序列称为内含子(intron)，内含子是在信使RNA被转录后的剪接加工中去除的区域。 2.8 基因与基因组 断裂基因由一系列交替存在的外显子和内含子构成，基因的两端起始和结束于外显子，对应于其转录产物RNA的5′和3′末端。 如果一个基因具有n个内含子。则相应地含有n+1个外显子。 2.8 基因与基因组 通过比较mRNA与DNA的分子杂交，研究其结构发现，如果基因中含有内含子，因为其mRNA中没有相应的序列，在所形成的RNA-DNA杂交双链的某一部位就会出现不能配对的单链环，即是内含子。 此法还可确定内含子在基因中的位置和大小。 2.8 基因与基因组 必须从mRNA原初转录产物(hnRNA)中去除内含子序列，以产生一个只由外显子构成的信使RNA(mRNA)。从原初转录产物中除去内含子的过程叫做RNA剪接。 经过剪接后，所有的外显子按其在DNA上相同的顺序连接在同一个RNA分子上。 2.8 基因与基因组 DNA和相应信使RNA结构上的差异(断裂基因存在)在真核生物中普遍存在。 但也有一些真核生物的结构基因不含内含子，如在酵母基因组中大部分的基因是不中断的，组蛋白基因和干扰素基因等直接对应于其蛋白质产物。 某些低等真核生物的线粒体以及叶绿体基因中也发现有断裂基因。 2.8 基因与基因组 断裂基因在细菌中较为少见。 但在某些原核生物如古细菌和大肠杆菌的噬菌体中也发现了断裂现象。 2.8 基因与基因组 断裂基因共同的性质： 外显子在基因中的排列顺序与它在成熟mRNA产物中的排列顺序相同； 每种断裂基因在所有组织中都具有相同的内含子成分； 核基因的内含子通常含有无义密码子(nonsense codon)，因此一般没有编码功能； 2.8 基因与基因组 T4噬菌体是感染大肠杆菌(E.coli)的一种病毒，在它感染之后不到 30 min，寄主细胞就会裂解死亡，并释放出约100个左右的子代噬菌体颗粒，这种控制寄主细胞致死效应(快速溶菌)的功能，是由该噬菌体的rⅡ区编码的。 2.8 基因与基因组 深入研究发现rⅡ分为两个亚区：rⅡA和rⅡB，它们各产生一种特殊的物质，只有这两种物质同时存在时，才能使寄主菌大肠杆菌K株的细胞溶菌裂解。 2.8 基因与基因组 用rⅡA或rⅡB的突变型分别单独感染大肠杆菌K株细胞， 两种T4噬菌体都不能正常生长； 而用两种突变型混合感染K株细胞时，才溶菌裂解，噬菌体正常生长； 由此认为：rⅡA和rⅡB是互补的突变型。 2.8 基因与基因组 单突变体 单突变体 有互补作用 野生型 野生型 野生型 反式构型 两个突变发生在基因间可以互补 rⅡA亚区 rⅡB亚区 在rⅡA亚区内发生了突变的T4噬菌体，能与在ⅡB亚区发生了突变的T4噬菌体互补； 所以rⅡA和rⅡB是两个不同的功能单位。 2.8 基因与基因组 现代分子生物学文献中，顺反子和基因这两个术语是互相通用的。一般而言，—个顺反子就是—个基因，大约1500个核苷酸。它是由一群突变单位和重组单位组成的线性结构。 因此，顺反子的概念表明了基因不是最小单位，它仍然是可分的。 生物体内存在的游离核苷酸多是5’-核苷酸 2.8 基因与基因组 在分子水平上，由于所有生物DNA基本结构都一致，这是它们作为生物体的共性，又由于它们DNA序列上的不同，就形成了千差万别的生物界； 因此，来自两种生命形态（比如原核和真核）的基因(DNA)可以相互融合重组； 基因的DNA共性是实现基因工程(DNA重组)的重要理论基础之一。 2.8 基因与基因组 2.8.3 基因与多肽链 基因的主要编码产物：多肽链、rRNA、 tRNA以及小分子RNA 2.8 基因与基因组 1908年，Garrod在研究人类黑尿病(alkap tonurea)时认为，该病是由于缺乏某种酶催化的代谢所引起的。Beale等应用X- 射线诱导处理红色面包霉，获取了大量的营养缺陷突变体，进一步分析发现，这些突变的每一种都是由于单基因缺陷所致。 2.8 基因与基因组 由此，Beade和Tatum在1941年提出了“一种基因一种酶”假说。 认为生物体内发生的每—步代谢反应都由一种特殊的酶催化，而这种酶又是其特定基因的编码产物。一旦基因发生突变，由它指导合成的蛋白质也随之发生变化，一般为改性或失活。 2.8 基因与基因组 当一种蛋白质是由多亚基构成的聚合体时（异源多聚体蛋白质），