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姓 名：XXX 专业班级：药学0802 指导老师： XXX 雷帕霉素对新生大鼠多次癫痫发作的保护作用 选题的依据及意义 2 实验的内容及方法 研究的创新点和难点 预期研究成果 拟解决的主要问题 研究工作进度安排 选题的依据及意义 选题的意义 在多次惊厥发作的新生大鼠模型上获取 Rapamycin的治疗方案 选题的依据 Mammalian target of rapamycin (mTOR）信号通路具有始动自发性癫痫发生的可能，而rapamycin是mTOR的特异性抑制剂 rapamycin进行预防可减少了癫痫发作的细胞死亡，神经再生和苔藓纤维发芽 实验的内容及方法 新生大鼠 非rapamycin对照组 空白组 Rapamycin实验组 出生第4d、7d、10d给Pilo （空白组给生理盐水） 4W 水迷宫 组织化学 Timms染色 FJB染色 4w 1w Timms染色 第三次造模后4W 麻醉、硫化钠灌流 PFA灌流 取脑、蔗糖脱水 脑组织切片 检测苔藓纤维发芽状况 FJB染色 切片PBS冲洗 1%NaoH/80%酒精处理 70%酒精、蒸馏水依次浸泡2min 0.06%KmnO4 震荡染色10min、0.001%FJB溶液中20min 封片 检测单位面积内FJB阳性的细胞数 Morris水迷宫 迷宫为一直径120cm、深50cm的圆形水池，分为四个象限，内装自来水，水深25cm，盛水后加适量的墨水使之不透明，水温控制在26±1℃。将一直径10cm，高24cm的圆形平台固定于第三象限，且隐于水面下1cm。 操作 实验前将大鼠置于平台上2S，使之熟悉环境 将大鼠头对迷宫壁分别从第一、二、四、一象限投入水中，每次限定时间120s，如果大鼠找到平台，休息2s后移出；如果在120s内找不到平台，将大鼠捞起放于平台上2s使之熟悉再移出 每只大鼠一天做四轮，连续熟悉四天，第五天按上述过程做两轮，记录大鼠从投入至到达平台的总时间，总路程和平均速度 研究的创新点和难点 研究的创新点 为临床利用rapamycin治疗各种获得性癫痫提供有力的实践和理论依据 研究的难点 新生鼠的个体差异，以及行为学实验的特殊性，反复痫性发作模型的建立存在一定的困难 药品引发的痫性发作可能导致小鼠死亡率较高，样本容量要随之增加 拟解决的主要问题 如何成功建立匹鲁卡品多次诱导的新生大鼠模型 匹鲁卡品诱导的癫痫模型对于大鼠的学习记忆能力是否有影响？Rapamycin能否预防或减少其影响？ Rapamycin通过哪些机制影响大鼠的学习记忆能力 预期研究成果 Rapamycin能够预防或减少癫痫发作的细胞死亡和苔藓纤维发芽 成功建立匹鲁卡品多次诱导的新生大鼠癫痫模型 Rapamycin能够预防或降低癫痫发作的程度 研究工作进度安排 时间 进度 2011年11月 材料的收集，完成任务书 2011年12月 确定实验的基本方法，完成外文翻译、文献综述和开题报告 2012年1月 实验前期准备，实验技能的操作 2012年2月-4月初 具体实验的实施 2012年4月底-5月初 完成毕业论文初稿、定稿 谢谢老师 Thank you 谢谢各位老师 请提出宝贵的意见