质谱技术及其应用21世纪的最前沿科学之一-中国试剂网.PDFVIP

中国试剂网 2.5.55 质谱技术及其应用 21 世纪的最前沿科学之一，随着人类第一张基因序列草图的完成和发展，生命 科学的研究也将进入一个崭新的后基因组学，即蛋白质组学时代。正如基因草图 的提前绘制得益于大规模全自动毛细管测序技术一样，后基因组研究也将会借助 于现代生物质谱技术等得到迅猛发展。本文拟简述生物质谱技术及其在生命科学 领域研究中的应用。 1 质谱技术 质谱（ Mass SPectrometry ）是带电原子、分子或分子碎片按质荷比（或质量） 的大小顺序排列的图谱。质谱仪是一类能使物质粒子高化成离子并通过适当的电 场、磁场将它们按空间位置、时间先后或者轨道稳定与否实现质荷比分离，并检 测强度后进行物质分析的仪器。质谱仪主要由分析系统、电学系统和真空系统组 成。 质谱分析的基本原理 用于分析的样品分子（或原子）在离子源中离化成具有不同质量的单电行分子离 子和碎片离子，这些单电荷离子在加速电场中获得相同的动能并形成一束离子， 进入由电场和磁场组成的分析器，离子束中速度较慢的离子通过电场后编转大， 速度快的偏转小；在磁场中离子发生角速度矢量相反的偏转，即速度慢的离子依 然偏转大，速度快的偏转小；当两个场的偏转作用彼此补偿时，它们的轨道便相 交于一点。与此同时，在磁场中还能发生质量的分离，这样就使具有同一质荷比 而速度不同的离子聚焦在同一点上，不同质荷比的离子聚焦在不同的点上，其焦 面接近于平面，在此处用检测系统进行检测即可得到不同质荷比的谱线，即质谱。 通过质谱分析，我们可以获得分析样品的分子量、分子式、分子中同位素构成和 分子结构等多方面的信息。 质谱技术的发展 中国试剂网 2.5.55 质谱的开发历史要追溯到 20 世纪初 J.J.Thomson 创制的抛物线质谱装置，1919 年Aston 制成了第一台速度聚焦型质谱仪，成为了质谱发展史上的里程碑。 最初的质谱仪主要用来测定元素或同位素的原子量，随着离子光学理论的发展， 质谱仪不断改进，其应用范围也在不断扩大，到20 世纪50 年代后期已广泛地应 用于无机化合物和有机化合物的测定。 现今，质谱分析的足迹已遍布各个学科的技术领域，在固体物理、冶金、电子、 航天、原子能、地球和宇宙化学、生物化学及生命科学等领域均有着广阔的应用。 质谱技术在生命科学领域的应用，更为质谱的发展注入了新的活力，形成了独特 的生物质谱技术。 2 生物质谱技术 电喷雾质谱技术和基质辅助激光解吸附质谱技术是诞生于80 年代末期的两项轨 电离技术。这两项技术的出现使传统的主要用于小分子物质研究的质谱技术发生 了革命性的变革。它们具有高灵敏度和高质量检测范围，使得在pmol （10-12 甚 至fmol （10-15 的水平上准确地分析分子量高达几万到几十万的生物大分子成为 可能，从而使质谱技术真正走入了生命科学的研究领域，并得到迅速的发展。以 下主要介绍与生物医学有关的几项质谱技术。 电喷雾质谱技术 电喷雾质谱技术（Electrospray Ionizsation MassSpectrometry,ESI-MS ）是在毛细管 的出口处施加一高电压，所产生的高电场使从毛细管流出的液体雾化成细小的带 电液滴，随着溶剂蒸发，液滴表面的电荷强度逐渐增大，最后液滴崩解为大量带 一个或多个电荷的离子，致使分析物以单电荷或多电荷离子的形式进入气相。电 喷雾离子化的特点是产生高电荷离子而不是碎片离子，使质量电荷比（m/z ）降 中国试剂网 2.5.55 低到多数质量分析仪器都可以检测的范围，因而大大扩展了分子量的分析范围， 离子的真实分子质量也可以根据质荷比及电行数算出。 电喷雾质谱的优势就是它可以方便地与多种分离技术联合使用，如液一质联用 （LC －MS ）是将液相色谱与质谱联合而达到检测大分子物质的目的。 基质辅助激光解吸附质谱技术 基质辅助激光解吸附质谱技术（ MatriX AssistedLaser Desorption /Ionization,MALDI ）的基本