[理学]4细胞对金属离子浓度的调控.ppt

4 细胞内金属离子浓度的控制与应用 细胞结构——透射电子显微镜观察 主要内容 金属离子的有益作用和毒性效应 在严格调节之下的有益金属：铁 毒性金属实例：汞 金属离子梯度的产生 细胞内离子浓度的测定 有益金属离子：Ca, Fe, Zn… 1.浓度太低时，需要利用该离子的过程将受到不利影响，生物体产生金属离子的缺乏症；2.浓度适当时，满足生物体需要；3.浓度太高时，产生毒性效应，例如，过多的金属离子将结合到某一不恰当的部位时，阻碍了其他有益金属的结合。 有害金属离子：Hg, Cd… 没有特定的生物功能，当存在于细胞中时，产生较大的毒性。例如，在生物流体内生成不溶性的盐，参与降解蛋白质、核酸等生物大分子的水解反应，产生破坏性副产物，如羟自由基。 体内平衡：指有益金属离子的浓度保持在一个恰当的范围之内。 解毒：指降低无益金属离子的有害浓度。 体内平衡和解毒需要在金属离子的摄取、利用、贮存和排出过程之间有一个平衡，即代谢平衡。 实例1：铁 是所有生物体内的一种必需金属离子。主要作用包括传送分子氧、参与电子传递等。例如，铁缺乏时，满足不了血红蛋白合成的需要，将引起缺铁性贫血。 也是常见的一般毒性物质。当生物体内铁超载时，过剩的金属离子将催化产生活性氧物种(reactive oxygen species, ROS)，损伤组织——Fenton反应。 实例2：顺铂 在血液中，Cl-浓度高(100mM)，以Pt(NH3)2Cl2形式存在，生物活性较低； 扩散进入细胞，细胞内Cl-浓度低(3~20mM)，发生Cl-的取代反应，产生阳离子性水合物，最终与DNA结合成稳定的加合物。这些加合物是有害的，但是对肿瘤的有害程度大于对正常组织的有害程度，导致在生物体水平上的有益效应。 主要内容 金属离子的有益作用和毒性效应 在严格调节之下的有益金属：铁 毒性金属实例：汞 金属离子梯度的产生 细胞内离子浓度的测定 2. 铁的溶解、传输和摄取 铁的溶解、传输和摄取是由转铁蛋白(Transferrin, Tf)完成的： 血液中Fe3＋ FeTf 细胞内Fe3＋ Tf与铁的结合常数高(K表观～1020M-1) 结合特点：Tf与铁结合的同时，也同一个阴离子(如碳酸根)结合；Tf与碳酸根的结合促进了与铁的结合，反之亦然。在细胞内，这个协同作用对于铁的释放可能是很重要的。 铁贮存蛋白——铁蛋白(ferritin) 24个亚基(444kDa) 每个铁蛋白可结合4500个铁原子 3. 铁摄取和储存的金属调节 转铁蛋白受体(TfR) ——铁的摄取 铁蛋白(ft) ——铁的储存；当需要时，铁蛋白可以释放出大量的Fe3+供细胞所需。 在哺乳动物中，细胞通过依赖金属的方式在翻译水平上调节铁蛋白和转铁蛋白受体的表达，进而控制铁的摄取和储存，使生物体内的铁水平达到平衡。 铁调控元件 铁调控元件(Iron Regulated Element, IRE)：蛋白mRNA上的一段核苷酸序列，形成茎环结构(stem-loop)。 铁蛋白mRNA的5’端存在一个IRE；转铁蛋白受体mRNA的3’端存在几个IRE。 IRE是IRE结合蛋白结合到mRNA上的结合部位。 IRE结合蛋白 IRE结合蛋白(IRE binding protein, IRE-BP)：分子量约为90kD。 ?当IRE-BP与铁蛋白mRNA上的IRE结合时，它将阻止mRNA翻译成蛋白质； ?当IRE-BP与转铁蛋白受体mRNA上的IRE结合时，将抑制mRNA降解，导致翻译进行。 IRE-BP对IRE亲和性是受铁浓度调节的。在高铁水平下，IRE-BP与铁结合，对IRE有较低的亲和性；在低铁水平下， IRE-BP对IRE的亲和性增加。 主要内容 金属离子的有益作用和毒性效应 在严格调节之下的有益金属：铁 毒性金属实例：汞 金属离子梯度的产生 细胞内离子浓度的测定 1. 涉及汞解毒过程的酶 汞离子的毒性：①汞离子对巯基具有较大的亲和性，这种相互作用以及伴随所形成加合物的稳定性，使得很多蛋白质和酶结构中的必需巯基失活；②Hg(II)代谢产生一些毒性更大的有机汞化合物。 细菌内降低汞毒性的两种酶：有机汞裂解酶和汞离子还原酶。 2. 汞解毒基因的金属调节 汞解毒基因：有机汞裂解酶基因和汞离子还原酶基因。 MerR蛋白：一种在转录上控制汞解毒基因表达的细胞内汞传感器。 MerR是一种二聚的DNA结合蛋白，能专一性地与DNA部位结合。在缺乏结合汞的情况下(即汞离子浓度较低)，表现为调节它本身基因mer基因的转录。一旦结合汞后(即汞离子浓度较高时)，MerR将活化汞解毒基因的转录，最终解除汞的毒性。 汞离子浓度调节汞解毒基因的转录 主要内容 金属离子的有益作用和毒性效应 在严格调节之下的有益金属：