[生物学]第八讲酶的化学修饰.pptVIP

第八讲 酶的化学修饰 Chemical modification of enzyme 一、酶在实际应用中存在的问题 不稳定 条件要求太苛刻 主要动力学性质不适应工业生产要求(Km 值过高) 不适合临床应用(具抗原性,易被降解) 二、解决方法—改造 核酸水平的改造：蛋白质工程 蛋白质水平的改造：分子修饰 三、酶化学修饰基本原理 增加酶的天然构象的稳定性和耐热性 修饰剂分子存在多个反应基团，可与酶形成多点交联。使酶的天然构象产生“刚性”结构。 保护酶活性部位，抗抑制剂 大分子修饰剂与酶结合后，产生的空间障碍或静电斥力阻挡抑制剂，“遮盖”了酶的活性部位。 维持酶结构的完整性，抗蛋白酶水解 酶化学修饰后通过两种途径抗蛋白水解酶： 1. 大分子修饰剂产生空间障碍阻挡蛋白水解酶接近酶分子。“遮盖”酶分子上敏感键免遭破坏。 2. 酶分子上许多敏感基团交联上修饰剂后，减少了受蛋白水解酶破坏的可能性。 消除酶的抗原性 酶蛋白氨基酸组成的抗原决定簇，与修饰剂形成了共价键： 破坏了抗原决定簇——抗原性降低乃至消除 “遮盖”了抗原决定簇——阻碍抗原、抗体结合 稳定酶所处的微环境 化学修饰后，由于修饰剂本身属于多聚电荷体，可在酶分子表面形成一层缓冲外壳，借此抗御外界电荷与极性的变化，维持酶的稳定性。 1.1.5 分子间交联