2016新课标创新人教生物选修1 专题2 课题1 微生物的实验室培养.doc

一、培养基概念人们按照微生物对营养物质的不同需求配制出的供其生长繁殖的营养基质。种类按照培养基的物理状态划分为液体培养基和固体培养基。营养要素各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐此外还要满足微生物生长对 pH、特殊营养物质以及氧气的要求。二、无菌技术获得纯净培养物：关键是防止外来杂菌的入侵。无菌操作主要包(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。(3)为避免周围环境中微生物的污染实验操作应在酒精灯火焰附近进行。(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。消毒和灭菌(1)消毒概念：使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。常用的方法有煮沸消毒法和化学药剂消毒法。(2)灭菌概念：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子)。常见的方法有：灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。三、大肠杆菌的纯化培养制备固体培养基 2．纯化大肠杆菌(1)微生物接种最常用的方法平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作将聚集的菌种逐步稀到培养基的表面。稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。(2)微生物培养分析如果接种了大肠杆菌的培养基上生长的菌落颜色、形状、大小基本一致说明接种操作符合要求。若培养基上出现了其他菌落则说明接种过程中被杂菌污染。未接种大肠杆菌的空白对照的培养基在培养过程中若长出菌落说明灭菌不彻底实验失败。四、菌种保存 临时保藏法 甘油管藏法 适用对象 频繁使用的菌种 长期保存的菌种 培养基类型 固体斜面培养基 液体培养基 温度 4_℃ －20_℃ 方法 菌落长成后于冰箱中保存每3～6个月将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上 将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混合均匀后于冷冻箱内保存缺点 菌种易被污染或产生变异 / [共研探究] ．下面是察氏培养基(培养霉菌所用)的主要成分根据下表回答下列问题： 蔗糖 NaNO琼脂 水 20 g 3 g 1 g 1 g 0.5 g 0.01 g 20 g 定容至1 000 mL (1)该培养基根据物理性质划分应是固体培养基原因是该培养基中加入了凝固剂琼脂。(2)该培养基包含微生物生长和繁殖所需要的 4类营养物质(成分)分别是碳源、氮源、无机盐和水。有时候还需要加入营养物质(生长因子)。(3)①蔗糖提供碳源除此之外提供碳源的主要有：a.无机化合物CO、Na等；b.有机化合物糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等。提供氮源和无机盐。(4)碳源、氮源、生长因子在微生物体内的作用 营养要素 作用 碳源 构成生物体细胞的物质和一些代谢产物有些是异养微生物的能源物质 氮源 合成蛋白质、核酸及含氮代谢废物 生长因子 酶和核酸的组成成分【总结提升】　某些微生物的代谢及特点(1)硝化细菌：自养需NH或亚硝酸盐做氮源。(2)圆褐固氮菌：异养培养基中不3)金黄色葡萄球菌：异养培养基中需加高浓度食盐。(4)破伤风杆菌：异养厌氧。无菌技术(1)目的：防止外来杂菌的入侵。(2)消毒和灭菌的比较 项目 消毒 灭菌 概念 使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子) 用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物包括芽孢和孢子 常用方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 适用对象 操作空间、操作者、一些液体等 接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等(3)连线 (4)无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外还能有效避免操作者自身被微生物感染。【易错易混】(1)消毒与灭菌的最根本区别：芽孢和孢子是否存活。灭菌能杀死芽孢和孢子因而灭菌更彻底。(2)具体选择消毒还是灭菌需要考虑：一是效果灭菌的效果比消毒要好；二是操作对象的承受能力活体生物材料、操作者的手等只能采用消毒而不能灭菌。[总结升华]培养基的成分 营养物质 作用 功能 主要来源 碳源 能为微生物代谢提供碳元素 构成生物体的细胞物质和一些代谢产物有些是异养生物的能源物质 无机碳源：CO、NaHCO等；有机碳源：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等 氮源 能为微生物的代谢提供氮元素 合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物 无机氮源：N、NH、铵盐、硝酸盐等；有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨等 生长因子 是生长必不可少的 酶和核酸的组成成分 维生素、氨基酸、碱基等 水 是生命活动所必需的 不仅是优良的溶剂而且可维持生物大分子结构的稳定 外界摄入 无机盐 为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素包括大量元素 细胞的组成成分生理调节物质某些化能自养菌的能源酶的激活剂 无