[生物学]微生物的营养和培养基.ppt

第四章  微生物的营养和培养基 微生物细胞的化学元素与其营养物质 微生物生长所需的营养物质应该包含有组成细胞的各种化学元素，即构成细胞物质的碳素来源的碳源物质，构成细胞物质的氮素来源的氮源物质和一些含有K、Na、Mg、Ca、Fe、Mn、Cu、Co、Zn、Mo元素的无机盐。 微生物的营养物质及其生理功能 微生物生长所需要的营养物质主要是以的有机物和无机物的形式提供的，小部分由气体物质供给。微生物的营养物质按其在机体中的生理作用可区分为：碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水六大类。 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）： 　　马铃薯（去皮）200克　　葡萄糖 20克 　　琼脂 18～20克 　　pH值 5.5～6.0 制法：先将新鲜无病害的马铃薯洗净，去皮后切成小薄片，称200克，加水1000毫升，煮沸20分钟后过滤，其滤汁为马铃薯煮汁，然后加琼脂和葡萄糖煮溶，后补足水分至1000毫升，装管（瓶）灭菌备用。 一般真菌的分离和培养都适合此培养基。 2、根据培养基物理状态 液体培养基(liquid medium) 固体培养基(solid medium) 半固体培养基(semi-solid medium) 脱水培养基(dehydrated culture media) 琼脂 (Agar)： 从石花菜、江蓠、紫菜等红藻中提取的一种杂多糖，主要成分是聚半乳糖的硫酸酯； 在40℃以下凝固，约96℃融化； 培养基中加0.2%~0.5%琼脂获得半固体培养基； 培养基中加1.2~2.0%琼脂获得固体培养基。 伊红美兰乳糖培养基（Eosin Methylene Blue，EMB）是最常见的鉴别培养基，用于乳品和饮用水中大肠杆菌等细菌的检验。 EMB组成成分：蛋白胨，10g；乳糖，10g；K2HPO4，2g；20%伊红水溶液，20ml（0.4g伊红）；0.33%美蓝水溶 液，20mL（0.065g美蓝）；琼脂，25g；蒸馏水，1000ml，pH 7.2。 ⑵基团移位(Group translocation) 被运输的底物分子在膜内经受到了共价修饰，以被修饰的形式进入细胞质的输送机制。 e.g 大肠杆菌中基团移位过程： 磷酸丙酮酸盐+HPr 酶Ⅰ HPr-磷酸+丙酮酸盐 HPr-磷酸+糖 酶Ⅱ 糖-磷酸+ HPr 单、双糖及糖的衍生物、核苷和核苷酸的运输 Group translocation PEP + sugar (outside) pyruvate + sugar-P (inside) 有快由稀至浓内远高于外特异性耗能改变有有竞争性有葡萄糖，果糖，甘露糖，嘌呤，核苷脂肪酸等 有快由稀至浓 内远高于外特异性耗能不变有有竞争性有氨基酸,乳糖等糖类,Na+,Ca2+等 无机离子 有快由浓至稀内外相等特异性不耗能不变有有竞争性有SO42-,PO43-; 糖(真核生物) 无慢由浓至稀内外相等无特异性不耗能不变无无竞争性无H2O,CO2,O2,甘油,乙醇,少数氨基酸,盐类,代谢抑制剂 特异载体蛋白运输速度养分运输方向平衡时内外浓度运输分子能量消耗运送前后养分分子载体饱和效应养分类似物运输抑制剂 运输对象举例 基团转移 主动运输 促进扩散 单纯扩散 项目 四种跨膜运输营养物质方式的比较 第四节 培养基 培养基(medium, culture medium) 人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。广义的说，凡是支持微生物生长和繁殖的介质或材料 均可作为微生物的培养基。 培养基配制原则: ⑴目的明确 ⑵营养物应满足微生物的需要 ⑶营养物的浓度及配比应恰当 ⑷物理化学条件适宜（pH、渗透压、氧化还原电势） ⑸经济节约 培养基配制方法: 生 态 模 拟 参 阅 文 献 精 心 设 计 试 验 比 较 培养基的种类 1、根据对培养基成分了解的程度 天然培养基(natural medium) 半合成培养基(semi-synthetic medium) 合成培养基(synthetic medium) 许多微生物能利用 绝大多数微生物不能利用 微生物利用能力 18.3 0.4 氮(%) 0 0.77 氧化镁(%) 0 1.15 氧化钙(%) 14～15 16 灰分(%) 酸性 微酸 pH 20 40 凝固点(℃) 25 96 熔点(℃) 5～12 1.5～2 常用浓度(%) 明胶 琼脂 内容 琼脂与明胶主要特征比较 3、根据培养的目的 种子培养基 (seed m