苏云金芽孢杆菌制剂 - NY 293—95.docVIP

NY 293—95 1? 主题内容与适用范围 　　本标准规定了苏云金芽孢杆菌制剂（可湿性粉剂和悬浮剂）的技术要求、检验方法、检验规则以及标志、包装、运输、贮存。 　　本标准适用于微生物发酵方法制得防治鳞翅目害虫的苏云金芽孢杆菌制剂（可湿性粉剂和悬浮剂）。 　　本标准不适用于加有化学农药的苏云金芽孢杆菌复配制剂。 2? 引用标准 　　GB／T　1600? 农药水分测定方法 　　GB／T　1601? 农药pH值的测定方法 　　GB／T　1604? 农药验收规则 　　GB／T　1605? 商品农药采样方法 　　GB　3796? 农药包装通则 　　GB／T　5451 ? 农药可湿性粉剂湿润性测定方法 　　HG／T　2—896 ? 农药粉剂细度测定方法 3? 技术要求 3.1? 外观：可湿性粉剂为灰白色—棕褐色粉，悬浮剂为棕黄色－褐色悬浮液体。 3.2? 苏云金芽孢杆菌制剂还应符合表1要求： 表 1 　　级 别→项目↓　　 　可湿性粉剂　 悬浮剂 优级 一级 合格 优级 一级 合格 毒力效价〔Px IU/mg（μL）〕〔Ha IU/mg（μL）〕1） ≥32000 ≥16000 ≥8000 ≥8000 ≥4000 ≥2000 pH值 6.5～7.5 4.5～6.5 细度，μm 98％≤75μm200（目筛） 100％≤180μm（80目筛）98％≤150μm（100目筛） 悬浮率（有效成分），％ ≥80 ≥80 湿润时间，min ≤3 　 含水量，％（m/m） 4.0 　 　　注：1）? Px和Ha分别为Plutella? xylostella（小菜蛾）和Heliothis? armigera（棉铃虫）的缩写。 4? 检验方法 4.1? 毒力测定方法一：用小菜蛾（Plutela? xylostella）作试虫的测定方法[小菜蛾饲养方法见附录A（充件）]（仲裁法）。 4.1.1? 试剂或材料 4.1.1.1? 标准品：CS-95，H3ab，效价20 000 IU／mg； 4.1.1.2? 小菜蛾幼虫：Plutella xylostella； 4.1.1.3? 食用菜籽油； 4.1.1.4? 酵母粉：工业用； 4.1.1.5? 维生素C：医用，分析纯； 4.1.1.6? 琼脂粉：凝胶强度大于300g／cm2； 4.1.1.7? 磷酸氢二钾（HG　3—1228）：分析纯； 4.1.1.8? 磷酸二氢钾（GB? 1274）：分析纯； 4.1.1.9? 聚山梨酯-80：粘度3.5×10－4～5.5×10－4m2／s； 4.1.1.10? 菜叶粉：甘蓝型油菜叶，80℃烘干，磨碎，过80目筛； 4.1.1.11? 蔗糖（HGB　3310）：分析纯； 4.1.1.12? 纤维素粉CF-11； 4.1.1.13? 氢氧化钾（GB／T? 2306）：分析纯； 4.1.1.14? 氯化钠（GB? 1266）：分析纯； 4.1.1.15? 15％尼泊金：对羟基苯甲酸甲酯（化学纯）溶于95％酒精； 4.1.1.16? 10％甲醛溶液：甲醛（GB? 685，分析纯）溶于蒸馏水； 4.1.1.17? 干酪素溶液：干酪素（BR生物试剂）2g加2mL1mol／m3氢氧化钾（4.1.1.13），8 mL蒸馏水，灭菌； 4.1.1.18? 磷酸缓冲液：氯化钠（4.1.1.14）8.5 g；磷酸氢二钾（4.1.1.7）6.0g，磷酸二氢钾（4.1.1.8）3.0g；聚山梨酯-80（4.1.1.9）溶液0.1mL；蒸馏水1? 000mL。 4.1.2? 仪器 4.1.2.1? 磨口三角瓶：250mL； 4.1.2.2? 分析天平：精确度0.1mg； 4.1.2.3? 电动搅拌器：无级调速，100～6? 000r／min； 4.1.2.4? 医用手术刀； 4.1.2.5? 振荡器； 4.1.2.6? 水浴锅； 4.1.2.7? 养虫管：9cm×2.5cm； 4.1.2.8? 烧杯：50mL； 4.1.2.9? 试管：18? mm×180mm； 4.1.2.10? 玻璃珠：φ5mm； 4.1.2.11? 移液管：10 mL。 4.1.3? 测定步骤 4.1.3.1? 感染液的配制 　　a.? 标准品：用分析天平（4.1.2.2）准确称取标准品（4.1.1.1）100.0～150.0mg，精确到0.1mg，装入250mL装有10粒玻璃珠（4.1.2.10）的磨口三角瓶（4.1.2.1）中；加入100 mL磷酸缓冲液（4.1.1.18），浸泡10min，在振荡器（4.1.2.5）上振荡30min；得到浓度约为1mg／mL的标准品母液（该母液在4℃冰箱中可存放10d）；然后将标准品母液稀释成浓度为（1.000，0.500，0.250，0.125