[医学]第八章 微生物的遗传变异和育种.pptVIP

微 生 物 学 第八章 微生物的遗传变异和育种 第一节 遗传变异的物质基础 微生物作为模式生物的生物学特性 一、遗传物质化学本质的确定 肺炎链球菌转化实验 噬菌体感染实验 植物病毒重建实验 肺炎链球菌转化实验 转化原理：1944年Avery等离体条件下的转化实验 植物病毒重建实验 （一）遗传物质的七个水平 细胞水平 细胞核水平 染色体水平 核酸水平 基因水平 密码子水平 核苷酸水平 1、细胞水平 原核细胞最大的细胞学特点就是无核膜与核仁的分化，只有一个核区称拟核。其染色体DNA处于拟核区，无组蛋白，近年来发现与非组蛋白结合。结构上为双链环状DNA。几种微生物染色体的物理特性见表。原核细胞的染色体外DNA主要指质粒（如F因子、R 因子、Col因子）。 真核细胞DNA分为核DNA和核外DNA。核DNA即染色体DNA，它与组蛋白结合构成具有复杂结构的染色体。核外DNA是指线粒体和叶绿体等DNA，其结构与原核细胞的DNA相似，亦能编码结构蛋白。 2、细胞核水平 操纵子 真核生物的基因结构 规范化表示 质粒是细菌染色体外的遗传物质，是环状闭合的双链DNA。 大质粒 小质粒 几种重要的质粒 致育质粒（F质粒） 耐药质粒 毒力质粒（Vi质粒） 细菌素质粒 代谢质粒 第二节 基因突变和诱变育种 基因突变 ：简称突变，是指细胞内（或病毒粒子内）遗传物质的分子结构或数量突然发生的可遗传的变化。从自然界分离的菌株称野生型，突变后的菌株称突变型（株） 一、基因突变 (一)、基因突变的类型 选择性基因突变 能用选择性培养基（选择性条件）快速选择出来的突变株 营养缺陷型 抗性突变型 条件致死突变型 非选择性基因突变 形态突变型 抗原突变型 产量突变型 突变率(mutation mate)指生物在一个世代中在特定条件下发生某一突变的几率。也就是突变体占该世代个体的比例。 亦可用每个单位群体在每个世代中产生突变株的数目来表示。常为10-6-10-9 一般突变是独立发生的。突变的基因不会影响其它基因的突变率 双重突变的几率是各个突变几率的乘积 （三）、突变的特点 稀有性 独立性 诱变性 稳定性 可逆性 自发性 不对应性 （四）、基因突变的自发性和不对应性的证明 1．变量试验 1943年Luria和Delbruck根据统计学的原理，设计了实验 2、涂布试验 1949年,Newcombe 与变量试验相似,但方法更为简便 固体平板培养法 3、影印培养(replica plating)试验 1952年,Lederberg夫妇 设计了一种更为 巧妙的影印培养法,直接证明了微生物的抗药性突变是自发产生,与相应的环境因素毫不相关的论点。 结论:基因突变是自发的，有不对应性 （五）突变及其机制 基因突变的原因是多种多样的,它可以是自发的或诱发的。 诱变又可分为点突变和畸变。 1、诱发突变 诱变：利用物理、化学或生物因素能显著提高基因自发突变频率的手段。 诱变剂(mutagen)：凡能显著提高突变频率的理化因子。 诱变：碱基对的置换 移码突变 染色体畸变 （1）碱基对的置换 DNA一种微小的损伤，典型的点突变，它只涉及一对碱基被另一对碱基所置换。 置换又可分为两个亚类: 转换：一个嘌呤被另一个嘌呤或是一个嘧啶被另一个嘧啶所置换; 颠换：一个嘌呤被另一个嘧啶或是一个嘧啶被另一个嘌呤所置换 。 导致置换的诱变剂 直接置换的诱变剂： 直接与核酸碱基发生化学反应，不论在机体内或在离体条件下均有作用。 种类很多,例如亚硝酸、羟胺和各种烷化剂(硫酸二乙酯,甲基磺酸乙脂,N-甲基-N′-硝 基-N-亚硝基胍,N-甲基-N-亚硝基脲,乙烯亚胺,环氧乙酸,氮芥等)。 间接置换的诱变剂： 作用：通过活细胞的代谢活动掺入到DNA分子中引起的,故是间接的。 引起这类变异的诱变剂是一些碱基类似物,如5-溴尿嘧啶(5-BU)、5-氨基尿嘧啶(5-AU)、8-氮鸟嘌呤(8-NG)、2-氨基嘌呤(2-AP)和6-氯嘌呤(6-CP)等。 （2）移码突变 指诱变剂使DNA分子中一个或少数几个核苷酸的增添(插入)或缺失,从而使该部位后面的全部遗传密码发生转录和翻译错误的一类突变。由移码突变所产生的突变株,称为移码突变株。 与染色体畸变相比,移码突变只能算是DNA分子的微小损伤。 吖啶类染料,包括原黄素、吖啶黄、吖啶橙和α-氨基吖啶等,以及一系列称为ICR类的化合物。 吖啶类化合物引起移码突变的机理 一种平面型三环分子,结构与一个嘌呤嘧啶对十分相