[基础医学]电解质演示文稿.pptVIP

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[基础医学]电解质演示文稿

电解质 河北省儿童医院检验科 黄慧 测定原理 电解质分析仪采用离子选择电极测量法来实现精确检测的.仪器上有七种电极:钠,钾,氯,钙,二氧化碳,糖和参比电极.每个电极都有一离子选择膜,会与被测样本中相应的离子产生反应,膜是一离子交换器,与离子电荷发生反应而改变了膜电势,就可检测液,样本和膜间的电势.膜两边被检测的两个电势差值会产生电流,样本,参考电极,参考电极液构成“回路”一边,膜,内部电极液,内部电极为另一边。内部电极液和样本间的离子浓度差会在工作电极的膜两边产生电化学电压,电压通过高传导性的内部电极引到到放大器,参考电极同样引到放大器的地点.通过检测一个精确的已知离子浓度的标准溶液获得定标曲线,从而检测样本中的离子浓度。 测定原理 核心在于其敏感膜,如缬氨霉素中性载体膜对K+有专一性,对K+的响应速度比Na+快1000倍;而硅酸锂铝玻璃膜对Na+的响应速度比K+快300倍,具有高度的选择性。离子选择电极法又分直接法和间接法。前者是指血清不经稀释直接由电极测量,后者是血清经一定离子强度缓冲液稀释后由电极测量。但两者测定的都是溶液中的离子活度。 质量控制 一、方法学差异 K+、Na+测定的FAES法、直接ISE法、间接ISE法的结果之间有一定差异。FAES和间接ISE的差别由于血清中水体积所占比例的改变而引起的,而直接ISE法所测定的是溶液中的离子活度,则不受此影响,但容易受潜在的标定偏差的影响,因为水质标准液和血清在电化学方面不相一致。在可用全血进行测定的仪器中,直接ISE法具有一定的优越性。间接ISE具有一般对样品体积需要量比其他方法小得多的优点,有文献报道,直接ISE法比间接ISE法及FAES法结果偏高2%-4%,因此有些采用直接ISE法的仪器设有校正程序,使测定结果与FAES法一致,但只适用于蛋白质和脂肪含量正常的标本。 质量控制 有关ISE法干扰因素的报道很多,如:碘解磷定使K+测定结果降低,血液中的CO2浓度影响pH测定,蛋白质浓度可影响血液钠和离子钙的测定,离子强度的增加可使血液离子钙的测定产生正误差,VitC使血液Na+测定结果降低,防腐剂迭氮钠使Cl-测定结果升高,HgCl2使K+测定结果降低,甘草酸二铵使K+测定结果降低。 常用消除干扰的方法有使用离子强度校准缓冲剂、加入隐蔽剂及氧化和还原剂、调节pH、在研究电极选择性的基础上预先分离干扰离子等。 标本要求 血清、肝素抗凝血浆或全血、尿和其他体液均是可接受标本。 抗凝剂 肝素钠或肝素锂。有文献报道,抗凝剂用量对全血样品电解质与葡萄糖测定结果有影响,更有文献明确指出肝素钠抗凝的血浆其钾测定值与血清钾结果有显著差异。尽管如此,这可以作为系统性偏差而得到纠正,临床化学实验室为了保证标本处理速度,大多数主张使用抗凝血,尤其是部分肾病综合征等患者很难分离血清的标本。有文献报道肝素钠比肝素锂抗凝血浆钠平均高1.1%,钾低0.2mmol/L。而肝素铵是不可接受的,对于离子选择电极方法,高浓度铵离子会使K+的结果升高。 抗凝剂 枸橼酸盐、草酸、EDTA等抗凝剂不能用于钙的测定,高浓度肝素可使K+测定结果升高、离子钙测定结果明显降低,文献推荐使用肝素锂。离子钙的测定中,由于血液离体后CO2的丢失导致pH升高,使得蛋白质结合钙增加,进而影响了离子钙的测定,使离子钙测定结果降低。故离子钙的测定最好用肝素抗凝血、密封、隔绝空气保存并立即测定。 标本采集及保存 标本采集要掌握好采血时间和正确的部位,标本采集最好在输液前进行,输液时必须在输液装置的对侧肢体采血,减少静脉补液对结果的影响,提示在静脉补钾输液结束半小时后采集血标本,其结果较为准确。 采血后应在3小时内从细胞中分离出来血清、血浆及其他体液,以避免作为细胞代谢的离子平衡偏移和pH变化。同样,全血标本的测定也应在3小时内进行分析。实验观察表明,抗凝血在37℃下2小时后分离血浆测定,钾平均低0. 2mmol/L、钠平均高3mmol/L;而在4℃下保存2小时后分离血浆测定,K+平均高0. 2mmol/L。其原因可能是,离体后红细胞、白细胞、血小板的Na -K- ATP酶(即钠一钾泵)仍在起作用,可使Na+转运到细胞外,与血浆中的K+进行交换使之进入胞内,造成Na+升高、K+降低;但在4℃时钠钾泵不启动,由于红细胞内的钾浓度比血浆高25倍,通过被动扩散,可使血浆K+浓度升高。 标本采集及保存 为了避免上述影响可以使用惰性分离胶促凝管。惰性分离胶促凝管内添加两种物质:惰性分离胶和促凝剂,促凝剂如硅土涂布在试管壁外观呈不均匀雾状可加速血液凝固,室温放置10min 血标本即可完全凝固;惰性分离胶是一种聚合高分子物质多为聚烯烃聚醋和丙烯,不溶于水,具有抗氧化、抗低温、高稳定性的特性,比重为 1.040 ~ 1

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