[自然科学]07药品无菌检测技术.pptVIP

第七章 药品无菌检测技术 药物制剂的卫生学检查意义 确定药物是否污染或其污染程度，控制药品的质量； 保证用药的有效性和安全性； 可作为衡量药品生产全过程卫生水平的根据之一。 药物微生物污染案例 2009年2月，香港有15名病人被发现肠道感染毛霉菌，其中5人死亡。经过调查，在一百五十个药物样本中，发现「別嘌醇」含毛霉菌。再追查十六个「別嘌醇100毫克样本，证实全部帶菌，「每克药丸有超过一万个毛霉菌」。 值得关注的是完全溶解「別嘌醇」後，才驗出毛霉菌。可见毛霉菌並非存在於药瓶、药物表面，而是药里面，说明是药品在生产时被污染出 药物制剂的卫生学检查两种情况 第一节 药品无菌检测概述 一、药品无菌检测概念及意义 一、药品无菌检测概念及意义 一、基础知识 一、药品无菌检测概念及意义 一、药品无菌检测概念及意义 正确进行样品采集（取样量及比例按药典规定） 严格进行无菌操作 无菌检查取样量及比例需按药典规定 无菌操作工作区与工作台面必须进行洁净度验证 GMP空气洁净度标准 二、药品无菌检测概况 二、药品无菌检测概况 二、药品无菌检测概况 二、药品无菌检测概况批出厂无菌制剂无菌检查的最少检验数量 二、药品无菌检测概况 培养基概念和必备条件 培养基的概念： 由人工配制的、适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物用的营养基质。 培养基的配制程序： 称量 二、药品无菌检测概况 第二节 药品无菌检测方法 无菌检查方法 阳性对照试验和阴性对照试验 阳性对照试验=阳性对照菌液+供试品 一、直接接种法 一、直接接种法 直接接种法注意点： 接种量不得大于培养基体积的10%； 硫乙醇酸盐液体培养基不得少于15ml 改良马丁培养基不得少于10ml 二、薄膜过滤法 无菌检查 薄膜过滤法 二、薄膜过滤法 三、结果判断 结果判断 当符合下列至少一个条件时，方可判试验结果无效： 无菌检查试验所用的设备及环境的微生物监控结果不符合无菌检查法的要求； 回顾无菌试验过程，发现有可能引起微生物污染的因素； 阴性对照管有菌生长； 供试品管中生长的微生物经鉴定后，确证是因无菌试验中所使用的物品和（或）无菌操作技术不当引起的。 第三节 药品无菌检测方法实例 注射剂的无菌检查 实训目的 掌握常用注射剂的无菌检查的方法及其结果分析与判断； 熟悉无菌检查使用的培养基； 能够规范书写检验报告书。 注射剂的无菌检查 实训原理 方法是按规定取一定量的检品，严格按照无菌操作技术，接种至需、厌氧培养基、真菌培养基中，在适宜的温度下培养一定时间，观察有无细菌、真菌生长，以判断检品是否无菌、是否合格。 主要程序如下 注射剂的无菌检查 实训材料 注射剂的无菌检查 实训过程 注射剂的无菌检查 实训过程 注射剂的无菌检查 实训过程 注射剂的无菌检查 实训过程 注射剂的无菌检查 实训过程 注射剂的无菌检查 实训过程的注意事项 无菌检查时，除无菌室应符合洁净级要求，应严格掌握无菌操作技术，使用的器材、培养基需灭菌彻底。 按药典要求的接种量接种。 阳性对照菌未生长时，供试品的检验结果应判为无效。 在培养期内必须逐日观察，了解培养过程的变化，不可在培养期结束时才观察结果。 注射剂的无菌检查 思考 中药和生物系 1 仪器：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌锅、烧杯、量筒、试管、吸量管、电热套、pH精密试纸、酒精灯、火柴等。 2 试剂：酪胨、氯化钠、葡萄糖、刃天青、L-胱氨酸、硫乙醇酸钠（或硫乙醇酸）、酵母浸出粉、牛肉浸出粉、蛋白胨、硫酸镁、磷酸氢二钾、琼脂等。 4 供试品：规格10ml葡萄糖酸钙注射液 3 阳性试验菌：金黄色葡萄球菌 1 实训用液、培养基的配制和仪器的包扎 ②配制0.9％无菌氯化钠溶液 （稀释液） ③配制试液和指示液：碘酒溶液、75％乙醇溶液 ①制备金黄色葡萄球菌菌悬液，用作阳性对照菌 ④制备营养肉汤培养基、硫乙醇酸盐流体培养基、改良马丁培养基 ⑤包扎1.0ml吸量管若干支。 ⑥包扎好的物品、稀释液和培养基，贴标签，统一灭菌，备用。 2 直接接种法 取若干支供试品11支，消毒后，用砂轮在安瓿颈部划一环行线，再用75％酒精棉球将碘酒擦净，待干，打开颈部后，按下表中的要求接种供试品管、阳性对照管和阴性对照管。 14天 14天 （阳性对照48~72小时） 培养时间 23℃~28℃ 30℃~35℃ 培养温度 － － 阴性对照 － 2.0ml（供试品） 1.0ml（阳性对照菌液） 阳性对照 2.0ml 2.0ml 供试品： 每种培养基10支 改良马丁培养基 硫乙醇酸盐流体培养基 真菌培养 好氧、厌氧菌培养 培养基 表 无菌检查接种及其培养 3 结果判断 阴性对照管应澄清无菌生长 阳性对照管细菌应生长良