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植物的克隆 3.植物细胞全能性表达的条件 离体状态（必要），无菌； 有一定的营养物质； 植物生长调节剂； 一定的外界环境条件（温度，光照） 植物组织培养的培养基 无机营养成分：C，H，O大量元素及部分微量元素 有机营养成分 ① 含N物质：包括维生素和氨基酸 ② 碳源：2%—5%的蔗糖 ③ 琼脂：起支持作用 ④ 相关激素：生长素，细胞分裂素和赤霉素 PH值：5.0－6.0 植物细胞培养的4种技术 组织培养：脱分化成愈伤组织（簿壁细胞），再分化为植株 悬浮细胞培养：愈伤组织在摇床上分散成单个细胞，再发育成胚状体，形成植株 原生质体培养：纤维素酶和果胶酶脱壁，获得原生质体。转基因受体、细胞融合、利用全能性诱导为完整植株 单倍体培养：花药离体培养 马铃薯是无性繁殖的作物，体内容易积累病毒，会导致其品质变差。目前对它进行脱毒处理最好的办法是 A．采用茎尖组织培养技术获得植株 B．采用基因工程技术培育抗虫植株 C．采用诱变育种培育抗性植物 D．采用杂交育种培育抗性植物 课堂反馈 * * 蝴蝶兰属热带气生兰，花形似蝴蝶，因而得名。其花形态美丽，色彩丰富，花期长，在热带兰中有“兰花皇后”之美称，是近年来最受欢迎的洋兰之一。蝴蝶兰是单茎性气生兰，植株极少发育侧芽，且种子极难萌发,对其进行常规性的繁殖，增殖速度很慢。你能想办法快速大量繁殖它吗？ 思考： 植物克隆的技术基础：植物组织培养 1958年,斯图尔德(美)胡萝卜组织培养 1、定义： 植物体的每个生活细胞都具有遗传上的全能性，因而都具有发育成完整植株的潜能。 2、原理： 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 3、体现： （1） 受精卵的全能性最高 （2） 受精卵分化后的细胞中，体细胞的全能性比生殖细胞的低。 （3）不同植物或同一植物的不同基因型 的个体，细胞的全能性表达程度不同 一、植物细胞的全能性 受精卵 生殖细胞 体细胞 ＞ ＞ 一、植物细胞的全能性 1.植物细胞全能性：植物体的每个生活细胞都具有遗传上的全能性，因而具有发育成完整植株的潜能。 2.原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因。 在生物体内为什么细胞没有表现出全能性,而是分化为不同的组织或器官呢? 基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果. 生物体的绝大多数活细胞含有该生物全部的遗传信息，具有遗传上的全能性，因而都具有发育成完整生物体的潜能。植物细胞和动物的受精卵等细胞能较强地表现这种全能性，而一般情况下高等动物细胞的全能性无法表现 4.全能性的体现 所有的植物生活细胞（即使是已经高度分化的细胞）都具有全能性，通过植物组织培养就可体现全能性 不同种类植物和同种植物的不同基因型个体之间遗传性的差异，全能性的表达程度大不相同 细胞全能性的比较： 受精卵生殖细胞（卵细胞或花药）干细胞体细胞 植物细胞动物细胞 分化程度低的细胞分化程度高的细胞 植物组织培养的一般程序： 脱分化 愈伤组织：相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织 再分化 调节营养物质、无菌条件和生长调节剂的适当配比 诱导根、芽顶端分生组织 离体的植物器官、组织或细胞 愈伤组织 根、芽或胚状体 小植株 脱分化 植物激素： 细胞分裂素、生长素等 再分化 植物组织培养 植物组织培养条件： 一定的营养物质和植物生长调节剂、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。 ★植物组织培养的一般程序： 脱分化 通过悬浮培养分散成单细胞 细胞质丰富、液泡小而细胞核大（胚性细胞的特征） 再分化 调节营养物质和生长调节剂的适当配比 包裹人工种皮，形成人工种子 胚状体 愈伤组织或创伤组织 产生的愈伤组织细胞与叶细胞在染色体的数目上是否相同？ 染色体上所含的遗传物质是否相同？ 细胞的形态结构是否相同？ 相同 相同 不同 是一种由相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的的新生细胞。 排列疏松无规则、高度液泡化、无定形态的薄壁细胞 切取 接种 愈伤组织的形成 试管苗的形成 试管苗大规模培养 移栽至土壤 染色体畸变 细胞核变异 非整倍体产生 遗传物质变化 激素水平打破 对外源生长物质敏感性下降 其他原因 生长发育条件变化 长期培养中细胞全能性下降的原因： 1、深入探讨特定植物细胞全能性的表达条件 2、尽量选择性状优良、细胞全能性表达充分的基因型 植物克隆成功的条件： 下列不能作为植物组织培养的材料是： A、秋海棠的叶 B、马铃薯的块茎 C、成熟的花粉 D、木质部中的导管细胞