食品化学第８章_酶教材教学课件.ppt

第8章 酶;8.1 概述;;这种分类法为每种酶规定了统一的编号。酶的编号由EC和4个用圆点隔开的数字组成，每一个分类层次都用一个数字与之对应，这样，每一种酶可以用4个阿拉伯数字来代表。 EC表示酶学委员会，第一个数字表示酶的大类，第二个数字表示酶的亚类，第三个数字表示酶的小组，第四个数字表示酶在小组中的序列号。;过氧化氢酶：EC 1.11.1.6 转化酶:EC 3.2.1.26 多功能酶可以有多个编号。;1.氧化-还原酶 Oxidoreductase 氧化-还原酶催化氧化-还原反应。 主要包括脱氢酶(Dehydrogenase)和氧化酶(Oxidase)。 如，乳酸脱氢酶催化乳酸的脱氢反应。;2.转移酶 Transferase 转移酶催化基团转移反应，即将一个底物分子的基团或原子转移到另一个底物的分子上。 例如， 谷丙转氨酶催化的氨基转移反应。;3.水解酶 Hydrolase 水解酶催化底物的加水分解反应。 主要包括淀粉酶、蛋白酶、核酸酶及脂酶等。 例如，酯酶(Esterase)催化的酯的水解反应 根据酶切部位，水解酶可分为内切酶和外切酶。 内切酶从聚合物长链分子的内部将分子切断； 外切酶则从长链分子的一端依次切下一个单位。;五、酶的活力 1.酶活力的定义：指酶催化一定化学反应的能力。 2.活力单位： 在特定条件下，1分钟内转化1微摩尔底物所需的酶量为一个活力单位(U)。 在25℃及其他酶最适条件下，在1min内1μmol的底物转化为产物的酶量称为酶的国际单位（IU）;比活力：每毫克酶蛋白所具有的酶活力。单位是u/mg。比活越高则酶越纯。 转化数：每分子酶或每个酶活性中心在单位时间内能催化的底物分子数(TN)。也称为催化常数（Kcat）。1/Kcat称为催化周期。碳酸酐酶是已知转换数最高的酶之一，高达36×106每分钟，催化周期为1.7微秒。;二、酶的活性中心 1.定义 酶是大分子，直接与底物接触并起催化作用的只是酶分子中的一小部分。 因此，人们认为，酶分子中有一个活性中心，它是酶分子的一小部分，是酶分子中与底物结合并催化反应的场所。;活性中心是有酶分子中少数几个氨基酸残基构成的 它们在一级结构上可能相距很远，甚至位于不同的肽链上，由于肽链的盘曲折叠而互相接近，构成一个特定的活性结构。 因此活性中心???是一个点或面，而是一个小的空间区域。;;;2.分类 活性中心包括底物结合部位和催化部位 前者负责识别特定的底物并与之结合。后者起催化作用 结合部位决定酶的专一性。 催化部位决定酶所催化反应的性质;;活性中心以外的部分并不是无用的，它们能够维持酶的空间结构，使活性中心保持完整。 在酶与底物结合后，整个酶分子的构象发生变化，这种扭动的张力使底物化学键容易断裂。这种变化也要依靠非活性中心的协同作用。;“诱导契合学说”,该学说认为酶表面并没有一种与底物互补的固定形状，而只是由于底物的诱导才形成了互补形状 当酶与底物接近时，酶蛋白受底物分子的诱导，其构象发生改变，变得有利于与底物结合和催化。 因此该学说认为酶分子的构象不是刚性的，而是柔性的。;;; Ｅ＋Ｓ＝ＥＳ＝Ｅ＋Ｐ v=Vmax×[S]/(Km+[S]) Vmax =k2[E]0 [E]=[E]0-[ES];米氏常数的意义 米氏常数的物理意义是反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度。 不同的酶具有不同Km值，它是酶的一个重要的特征物理常数，不随反应中加入酶的多少以及底物浓度的高低而变。;;双倒数作图法 将方程改写为 1/v=Km/Vmax×1/[S]+1/Vmax 实验时在不同的底物浓度测定初速度，以1/v对1/[S]作图，直线外推与横轴相交，横轴截踞为-1/Km，纵轴截踞为1/Vmax 。 此法称为Lineweaver- Burk作图法，应用最广，但实验点常集中在左端，作图不易准确。 ;;三、影响酶促反应速度的因素 1. 底物浓度对酶促反应速度影响 在酶浓度，pH，温度等条件不变的情况下研究底物浓度和反应速度的关系。如后图所示： 在低底物浓度时，反应速度与底物浓度成正比，表现为一级反应特征。 当底物浓度达到一定值，几乎所有的酶都与底物结合后，反应速度达到最大值(Vmax)，此时再增加底物浓度，反应速度不再增加，表现为零级反应。;根据上图，请说明在测定酶活时，底物浓度多高比较合适？;2.pH的影响 大部分酶促反应速度受pH值的影响，某一特定的酶在一定的pH值条件下活力最高，该pH值称为该酶的最适pH。偏离最适pH酶的活力都会降低。 一般酶的最适pH在6－8，少数酶需偏酸或碱性条件。如胃蛋白酶最适pH在1.5，而肝精氨酸酶在9.7。 ;pH影响酶的构象，也影响与催化有关基团的解离状况及底物分子的解离状态。 最适pH有时因底物种类、浓度及缓冲溶