发酵工程第5讲(2011.3).pptVIP

共获得5U的总标准样45杯，其他各浓度的5U样9杯，分别算得总标准样r1及其他各浓度的9杯的r2，r1与r2的差数及分别是各组的校正数。各浓度的9杯r平均值加校正数后制标准曲线。 logM r b.样品的测定： 将标准曲线实验中的中心点保留，另外的三杯（管）换成样品，校正后查表即可。 谢 谢！ 5 pH值对发酵过程的影响及其调控 每一类微生物都有最适的和能耐受的pH范围。 发酵液pH是微生物代谢的综合反映，它对菌体的生长和产品的积累有很大的影响。发酵生产中应建立正常走势曲线 发酵过程中pH是不断变化的，通过观察pH变化规律可以了解发酵的正常与否 5.1 发酵过程pH值变化的原因 5.1.1 基质代谢 糖代谢：特别是快速利用的糖，分解成小分子酸、醇，使pH下降。糖缺乏，pH上升，是补料的标志之一 氮代谢：氨基酸被利用后产生NH3 ， pH会上升；尿素被分解成NH3，pH上升。 生理酸、碱性物质利用后pH会上升或下降 5.1.2 产物形成 某些产物本身呈酸性或碱性，使发酵液pH变化，如有机酸类产生使pH下降。红霉素、洁霉素、螺旋霉素等抗生素呈碱性，使pH上升。 5.1.3 菌体自溶 pH上升，发酵后期，pH上升。 5.1.4 杂菌的污染 pH下降 5.2 pH值对发酵的影响 5.2.1 pH影响酶的活性。当pH值抑制菌体某些酶的活性时使菌的新陈代谢受阻 5.2.2 pH影响微生物细胞膜所带电荷。从而改变细胞膜的透性，影响微生物对营养物质的吸收及代谢物的排泄，因此影响新陈代谢的进行 5.2.3 pH值影响培养基某些成分和中间代谢物的解离，从而影响微生物对这些物质的利用 5.2.4 pH值影响代谢方向 pH不同，往往引起菌体代谢过程不同，使代谢产物的质量和比例发生改变。例如黑曲霉在pH2~3时发酵产生柠檬酸，在pH近中性时，则产生草酸。 谷氨酸发酵，在中性和微碱性条件下积累谷氨酸，在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺。 5.2.5 pH在微生物培养的不同阶段有不同的影响 pH对菌体生长影响比产物合成影响小 例 青霉素：菌体生长最适pH3.5~6.0, 产物合成最适pH7.2~7.4 四环素：菌体生长最适pH6.0~6.8，产物合成最适pH5.8~6.0 5.2.6 pH值影响某些产物的稳定性 青霉素发酵中，碱性条件下发酵单位低。 沙纳霉素的发酵中， pH值高于或低于6.7-7.5时，产 物沙纳霉素的稳定性降低，半衰期缩短，发酵单位下 降。 5.3 最佳pH的确定 配制不同初始pH的培养基，摇瓶考察发酵情况 pH对产海藻酸裂解酶的影响 5.4 pH值的控制 5.4.1 调节好基础料的pH(特别注意C/N)。基础料中若含有玉米浆，pH呈酸性，必须注意调节pH。 5.4.2 在基础料中加入维持pH的物质，如CaCO3 ，或具有缓冲能力的试剂，如磷酸缓冲液等 5.4.3 通过补料调节pH，在发酵过程中根据糖氮消耗需要进行补料。 5.4.4 发酵的不同阶段控制不同的pH值 例：pH对L-异亮氨酸发酵的影响 菌株最适生长pH控制在6.8～7.0 第八章 微生物培养过程的参数检测 物理参数的测定 化学参数的测定 生物参数的测定 1、 概述 物理参数：温度、搅拌转速、空气压力、空气流量、表观粘度、浊度、罐压、泡沫等。 化学参数：基质浓度（包括糖、氮、磷等）、pH、产物浓度、溶氧浓度、 CO2浓度、核酸量等。 生物参数：菌丝形态、菌浓度、菌体比生长速率、呼吸强度、关键酶活力等。 三大参数从检测手段分可分为：直接参数、间接参数 直接（状态）参数： 通过仪器或其它分析手段可以测得的参数，如温度、pH、残糖等。 直接参数——在线检测参数和离线检测参数 在线检测参数 指不经取样直接从发酵罐上安装的仪表上得到的参数，如温度、pH、搅拌转速、溶氧等。 在线检测必须用专门的传感器（也叫电极或探头）放入发酵系统，将发酵的一些信息传递出来，为发酵控制提供依据。 由于微生物培养过程是纯培养过程，无菌要求高，因此对传感器有特殊要求： 插入罐内的传感器必须能经受高压蒸汽灭菌（材料、数据） 传感器结构不能存在灭菌不透的死角，以防染菌（密封性好） 传感器对测量参数要敏感，且能转换成电信号。（响应快、灵敏） 传感器性能要稳定，受气泡影响小。 在线检测原理： 化学或物理信号 电信号 放大