2.生物工程分析的基础知识PPT.ppt

第2章 生物工程分析的基础知识;2.1 概述;2.2?分析样品的采集、制备及保存;;;;;; 3.液体样品 液体样品，先混合均匀，用吸法分层取样每层取500ml，装入瓶中混匀得平均样品。 4.小包装的样品 对于小包装的样品是连包装一起取（如罐头，奶粉）一般按生产班次取样，取样数为1/3000，尾数超过1000的多取1罐，但是每天每个品种取样数不得少于3罐。 5.不均匀的样品 ;6.生物活性样品的采集: (1)生物材料的采集尽可能地接近正常状态下获得组织和器官。必须快速，及时速冻、低温保存 (2)血样采集用得较多的方法是静脉采血 (3)尿样通常取在规定时间内的尿液 (4)唾液采样一般是在漱口后15 min,收集口内自然流出或舌在口腔内搅动后流出的混合唾液;2.2.2 样品的制备;;;;;2.2.3 样品的保存 ;2.3 样品的预处理;二. 样品预处理的评价准则: (1)是否能最大限度地除去干扰物 (2)被测组分的回收率是否高 (3)操作是否简便、省时 (4)成本是否低廉 (5)对人体和环境是否产生影响;;(一）蒸馏法 　　利用液体混合物中各组分挥发度的不同分离为纯组分的方法叫蒸馏。 　　（1）常压蒸馏 　　当被蒸馏的物质受热后不发生分解或在沸点不太高的情况下，可在常压进行蒸馏。;（2）减压蒸馏 　　当常压蒸馏容易使蒸馏物质分解，或其沸点太高时，可以采用减压蒸馏。减压装置可用水泵或真空泵。 （3）水蒸汽蒸馏 　　将水和与水互不相溶的液体一起蒸馏，这种蒸馏的方法就成为水蒸汽蒸馏。 （4）分馏 　　分馏是蒸馏的一种，是将液体混合物在一个设备内同时进行多次部分汽化和部分冷凝，将液体混合物分离为各组分的蒸馏过程。这种蒸馏方法用于这种混合液体，即它的两种或两种以上组分是可以互溶而且沸点相差很小的。 ; 　　在高温或强氧化条件下，使样品中有机物质分解，并在加热过程中成气态而逸散掉。可分为干法灰化和湿法消化两大类。 2.3.3.1 干法灰化:是一种用高温灼烧的方式破坏样品中的有机物的方法，又称灼烧法。样品在灰化炉中（一般550摄氏度）被充分氧化。为了避免测定物质的散失，往往加入少量碱性或酸性物质（固定剂），通常称为碱性干法灰化或酸性干法灰化。 ;干法??化优点 ①基本不加或加入很少的试剂，故空白值低。 ②因灰分体积小，因而可处理较多的样品，可富集被测组分。 ③有机物分解彻底，操作简单。;缺点 ①所需时间长。 ②因温度高易造成易挥发元素的损失。 ③坩埚对被测组分有吸留作用，使测定结果和回收率偏低。;灰化操作注意事项： （1）灰化前样品应进行预炭化。 （2）样品炭化、加硝酸溶解残渣等操作应在通风橱内进行。 （3）高温炉内各区的温度有较大的差别。 （4）应根据待测组分的性质，采用适宜的灰化温度。;（5）采用瓷坩埚灰化时，不宜使用新的，以免新瓷坩埚吸附金属元素，造成实验误差。 （6）如样品较难灰化，可将坩埚取出，冷却后，加入少量硝酸或水湿润残渣，加热处理，干燥后再移入高温炉内灰化。 （7）湿润或溶解残渣时，需待坩埚冷却至室温方可进行，不能将溶剂直接滴加在残渣上。;（8）从高温炉中取出坩埚时，避免高温灼伤。 （9）坩埚从炉内取出前，先放置于炉口冷却，并在耐火板上冷却至室温。 切忌直接置于木制台面、有机合成台面上以免烫坏台面，也不宜直接置于导热系数较高的台面上，以免陡然遇冷引起坩埚破裂。 ;2..3.3.2 湿法消化法;优点：有机物分解速度快、处理时间短、方法得当时，元素无损失、…… 缺点：产生有害气体；需随时照管（初期易产生大量泡沫外溢）；试剂用量较大，空白值偏高、……;按消化措施分： 1. 敞口消化法 2. 回流消化法 3. 密封罐消化法 4. 微波消解法;2.3.3.3 微波消解法 又称为“微波辅助化学消解” 使用程序化的微波湿法消化器，系统可以程序升温，先脱水，然后湿法消化，同时可控制真空度和温度，与马福炉相比缩短了灰化时间，如面粉的微波湿法灰化只需10～20min。对于植物样品(除铜的测定外)，用微波系统灰化20min就足够了，而要得到类似的结果，用马福炉则需要40min~4h。;;　（三）溶剂提取法 　　在任一溶剂中，不同的物质具有不同的溶解度，利用混合物中各物质的溶解度的不同，将混合物组分完全或部分地分离，此过程叫萃取，也称提取。 　　（1）溶剂分层法 　　;　　（2）浸泡法 　　从固体混合物或有机体中提取某种物质时，一般采用浸泡法，所以这种方法称为浸提。常用的是索克斯特式提取器（简称索氏提取器）。 　　 （3）盐析法 　　向溶液中加入某一物质，使溶质溶解在原溶剂中的溶解度大大降低，从而从溶液中沉淀出来，这个方法叫作盐析。;