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《动物生物化学》课件15 蛋白质的生物合成-翻译
原料氨基酸,20种 mRNA是合成蛋白质的“蓝图(或模板)” tRNA是原料氨基酸的“搬运工” rRNA与多种蛋白质结合成核糖体,作为合成多肽链的 “装配机(操作台)” mRNA是遗传信息的载体(载有遗传密码,genetic code),是合成蛋白质的蓝图(模板),它以一系列三联体密码子(codon)的形式从DNA转录了遗传信息。每个密码子代表一个氨基酸。 mRNA占细胞总RNA的5-10%,不稳定,寿命短。 原核的mRNA 是多顺反子;真核的mRNA 是单顺反子。 遗传密码 上世纪60年代,利用均聚核苷酸实验,破译了遗传密码。 遗传密码为三联体(每三个碱基代表一个氨基酸),由5’到3’阅读,无间断。即使在少数重叠基因(如病毒)中,其开放阅读框架(open reading frame, ORF)仍按此原则。 起始密码为AUG, 终止密码为UAA,UAG和UGA。 5’AUG CCA UGC ACC CGG GUU …………..CAA UAG 3’ Pro Cys Thr Arg Val …………..Gln 密码有简并性(degeneracy),即一个氨基酸可由几个密码子表示;通用性,大多数生物使用同样的遗传密码,但也会有所偏爱。 原核tRNA有30-40种,真核有50-60种,含70-90个核苷酸, 并有多种稀有碱基。 tRNA是最小的RNA, 占细胞总RNA 的15%左右,其功能是搬运氨基酸和解读密码子。 tRNA 具有“四环一臂”和“三叶草” 形的典型结构。 tRNA的功能是解读mRNA上的密码子和搬运氨基酸。 tRNA上至少有4 个位点与多肽链合成有关:即3’CCA氨基酸接受位点、氨基酰-tRNA合成酶识别位点、核糖体识别位点和反密码子位点。 每一个氨基酸有其相应的tRNA携带, 氨基酸的羧基与tRNA的 3’ CCA-OH 以酯键结合。而tRNA的反密码子可以与mRNA上相应的密码 子互补结合, 以使氨基酸正确“对号入座” (因为密码子的序列对应于多肽链上 的氨基酸序列)。 密码子与反密码子的配对方式 核糖体是rRNA 与几十种蛋白质的复合体,有大、小两个亚基构成。含有合成蛋白质多肽链所必需的酶、起始因子(IF)、延伸因子(EF)、释放因子(RF)等。 原核的核糖体(70S)= 30S小亚基 + 50S大亚基 30S小亚基: 16S rRNA + 21种蛋白质 50S大亚基: 23S,5SrRNA + 34种蛋白质 真核的核糖体(80S)= 40S小亚基 + 60S大亚基 40S 小亚基: 18S rRNA + 33种蛋白质 60S 大亚基: 28S,5.8S,5SrRNA + 45种蛋白质 核糖体有4个基本功能 1. 容纳mRNA,并能沿着mRNA由5’——3’ 移动,由tRNA解读其密码; 2. 氨基酰位点(A位点),可结合氨基酰-tRNA(AA-tRNA); 3. 肽酰基位点(P位点),可结合肽酰基-tRNA(肽-tRNA); 4. 脱氨基酰tRNA的出口位(E位点) ; 5. 肽酰基转移酶中心,是形成肽键的位点等。 所有参与合成多肽链的氨基酸都要激活,并由数十种高度专一的氨基酰-tRNA合成酶催化。该酶由两个识别位点,它们能识别特定的氨基酸和选择其所对应的tRNA,使两者连接起来(利用ATP)。 反应如下: 氨基酸的羧基与tRNA 的3’端CCA-OH 以酯键相连,因此其氨基是自由的。 首先IF3、IF1帮助30S小亚基 与mRNA结合,I
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