第5章原生质体及细胞悬浮培养.ppt

第五章 原生质体及细胞悬浮培养;第一节 细胞悬浮培养;悬浮细胞的优势;Callus Formation ….…;一、细胞的分离;2. 酶解法 ;3. 由愈伤组织获得;由愈伤组织获得游离细胞的方法 ;悬浮系的建立;二、悬浮培养类型;悬浮培养中细胞生长动态;细胞生长动态;2. 连续培养;② 开放型;三、建立细胞悬浮培养体系;1.选择合适的外植体 ;2.诱导疏松易碎的愈伤组织 ;诱导疏松易碎的愈伤组织;3.悬浮继代培养 ;四、细胞生长与活力测定 ;细胞活力测定;五、悬浮培养细胞的同步化;2. 同步化化学方法;② 同步化化学方法－抑制法;第二节 细胞培养生产有用物质;细胞生长与次生物质合成;植物产生代谢产物的类型;植物次生代谢产品的市场潜能;一、细胞悬浮培养及其相关因子 ;1. 外植体的选择 ;高产细胞系筛选是必要的;单细胞培养方法－平板培养法 ;植板效率 ;看护培养法 ;看护培养;微室培养法 ;微室培养;通过筛选提高产率的典型例子 ;2. 培养基的选择 ;(2) 碳源 ;(3) 生长调节物质;(4) pH值 ;(5) 其它有机物(前体);两阶段培养法 ;3. 环境因子的影响 ;(2) 温度 ;(3) 振荡频率 ;4. 植物细胞的大规模悬浮培养 ;(1) 植物细胞与微生物细胞的差异 ;(2)植物细胞培养的生物反应器 ;机械搅拌式培养系统 ;Glycoside production by in vitro Rhodiola rosea (红景天) cultures ;Rhodiola rosea 红景天;Rhodiola rosea 红景天;红景天所含的生理活性物质;二、植物细胞固定化培养;1. 固定技术的优点;2. 细胞固定化培养的类型;细胞固定化技术的应用;固定化的植物细胞种类及方法 ;固定化材料－可溶性胶;固定化材料－不溶性物;三、生物转化的研究 ;生物转化类型;生物转化类型;第三节 原生质体培养;原生质体研究进展;研究进展及趋势;一、原生质体的分离(酶解法);2. 材料处理;3. 酶处理;4. 渗透压调节剂;二、原生质体的收集和纯化;2. 飘浮法;三、原生质体活力检测;四、原生质体培养;4、原生质体培养方法;原生质体培养方法;五、愈伤组织形成和植株再生;第四节 植物体细胞杂交;植物细胞杂交的几个重要事件;植物细胞杂交的几个重要事件;原生质体融合的类型;一、融合方法;融合技术要点;2．电融合法;Electrofusion;Banana protoplasts and regeneration;Asymmetric somatic hybrids;Control plant and resistant hybrid plant;二、杂种细胞的发育动态;杂种细胞的发育动态;三、杂种细胞的选择与鉴定;1．杂种细胞的选择系统;② 机械选择法;2．体细胞杂种的鉴定;体细胞杂交的困难及发展趋势;第五节 发根培养技术的应用;发根培养的意义;Agrobacterium Indeced tumors;Agrobacterium induced tumors;Hairy root cultures of Bidens sulphureus;Bioreactor ;Tobacco hairy root culture (21 d old);一、发根具有的特点;发根的特点;Tobacco hairy root suspension culture;Growth of hairy root suspension culture;发根培养的例子;二、发根的形成机制;Ri质粒的结构;Ti Plasmid;发根农杆菌的致病过程;发根农杆菌的致病过程;General model of Agrobacterium-mediated transformation of a plant cell;三、影响发根农杆菌致病的因素 ;影响发根农杆菌致病的因素;影响发根农杆菌致病的因素;四、影响发根培养及次生代谢产物合成的因素 ;影响因素;影响因素;五、存在的问题 ;Cotton hairy roots -gossypol;Transfers cotton hairy roots;High GFP expressing tobacco hairy root;Induction of genetically modified hairy roots;Fermentors for hairy roots - ROOTec;Low Cost Mist Bioreactor - ROOTec;;;思 考 题;思 考 题;思 考 题;