CN106950305-CN201710189493-红牛膝的检测方法.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 106950305 A (43)申请公布日 2017.07.14 (21)申请号 201710189493.1 (22)申请日 2017.03.27 (71)申请人 西南民族大学 地址 610041 四川省成都市武侯区一环路 南四段16号 (72)发明人 刘圆　王景富　王静霞　李莹　 (74)专利代理机构 北京国坤专利代理事务所 (普通合伙) 11491 代理人 郭伟红 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/90(2006.01) 权利要求书2页 说明书13页 附图8页 (54)发明名称 红牛膝的检测方法 (57)摘要 本发明提供了红牛膝的检测方法，它是采用 UPLC检测方法实现的。本发明首次使用3-O-[α- L-吡喃鼠李糖(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖醛酸]- 齐墩果酸-28-O-(β-D-吡喃葡萄糖)作为检测红 牛膝的指标成分，本发明采用UPLC对红牛膝中的 该成分进行检测，具有良好的稳定性、重现性，并 且本发明检测方法能够有效将该成分与其他成 分分离，不仅能够达到对该成分的定性，还可以 同时满足定量检测的需求。 A 5 0 3 0 5 9 6 0 1 N C CN 106950305 A 权　利　要　求　书 1/2页 1.红牛膝的检测方法，其特征在于：它包括如下操作： (1)取红牛膝，以含水或不含水的醇类溶剂提取，提取液浓缩至无醇味，以石油醚-水两 相溶剂进行脱脂，剩余水相再用正丁醇萃取，取正丁醇相，除去正丁醇后，使用适当溶剂制 备供试品溶液； (2)取3-O-[α-L-吡喃鼠李糖(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖醛酸]-齐墩果酸-28-O-(β-D-吡 喃葡萄糖)，使用适当溶剂制备对照品溶液； (3)将供试品溶液和对照品溶液经超高效液相色谱法检测，即可实现定性或定量检测； 其中，色谱条件如下: 色谱柱：填料为C18，尺寸为2.1×50mm，1.7μm 流动相：乙腈-磷酸水溶液，洗脱程序为： 2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(1)中，所述醇类溶剂选自甲醇或 乙醇；所述含水醇类溶剂中醇类溶剂的浓度为60～85％v/v。 3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：步骤(1)中，所述含水醇类溶剂中醇类 溶剂的浓度为70～80％v/v。 4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述适当溶剂选自甲醇、含水甲醇、乙 腈或含水乙腈。 5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(3)中，所述磷酸水溶液中，磷酸 的浓度为0.05～0.15％v/v。 6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：检测波长为约210nm。 7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：色谱条件中，流动相流速为0.2mL.min -1，柱温为40℃。 8.红牛膝的质量检测方法，其特征在于：按照权利要求1～7任意一项所述方法进行检 测，检测结果满足如下条件，证明红牛膝质量合格； 经检测，按干燥品计算，红牛膝中含3-O-[α-L-吡喃鼠李糖(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖醛 酸]-齐墩果酸-28-O-(β-D-吡喃葡萄糖)不少于1.0％w/w。 9.红牛膝的质量检测方法，其特征在于：它包括如下步骤： A、薄层检测： 取红牛膝，以含水或不含水的醇类溶剂提取，提取液浓缩至无醇味，以石油醚-水两相 溶剂进行脱脂，剩余水相再用正丁醇萃取