(精编)【医学课件】 PRRS的现状及其免疫教学课件.pptVIP

(精编)【医学课件】 PRRS的现状及其免疫教学课件.ppt

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1、试验概况 实验材料 “蓝定抗”抗原(CH1-R株弱毒) :产品批号 2011002 106.0TCID50/头 “蓝定抗” 专用佐剂 (稀释液):批号 2011002 PRRSV强毒(TJ株):5代,4~8周龄抗原抗体阴性猪,肌注105.0TCID50/头,观察21d应5/5发病,致少3/5死亡(45,5/5, 4/5) 实验动物 同一母猪生产的,30-35日龄断奶仔猪, 没有免疫过任何其他疫苗 实验前帅选项目:CSFV抗原Ag、抗体Ab、PRRSV抗原、抗体,PRV gE抗体,PCV-2抗体、抗原 实验动物房:福州大北农质检中心无菌动物房 阴性猪筛选结果 时间 采血日龄 蓝耳 抗原 蓝耳 抗体 (LSI) 猪瘟 抗原 猪瘟 抗体 伪狂犬 gE抗体 圆环 抗体 6.27 23日龄 (阴性猪筛选) / 16/16(—) 16/16 (—) 16/16 (—) 16/16 (—) 15/16(+) 1/16(±) 7.5 31日龄 (试验前3天复检) 16/16 (—) 16/16 (—) 16/16 (—) 16/16 (—) 16/16 (—) 16/16(+) 试验猪分组 将16头34日龄仔猪随机分为A、B、C、D四组,每组分别饲养于相对独立的猪栏 试验A组5头:肌注 蓝定抗抗原1头份+专用佐剂2ml 试验B组5头:肌注 蓝定抗抗原1头份+常规稀释液2ml 试验C组5头:空白对照组 试验D组1头:肌注 专用佐剂2ml 组别 专-1 专-2 专-3 专-4 专-5 普-1 普-2 普-3 普-4 普-5 空-1 空-2 空-3 空-4 空-5 D 62日龄,攻毒TJ株 34日龄,分组-免疫 31日龄,采血检测核定阴性猪 23日龄,采血检测确定阴性猪 免疫后1、3、5、7、14、21、28天采血检测 攻毒后1、3、5、7、14、21、28天采血检测 攻毒后至第28d试验猪死亡时间 组别 汇总 发病猪死亡时间 专-1 死亡           19d死     专-2 存活                 专-3 存活                 专-4 存活                 专-5 死亡       16d死         普-1 存活                 普-2 死亡       16d死         普-3 死亡         17d死       普-4 存活                 普-5 死亡       16d死         空-1 死亡 11d死               空-2 死亡   13d死             空-3 死亡             21d死   空-4 死亡   ? 14d死           空-5 死亡 11d死           ?   D 死亡               25d死 攻毒保护率 空白组 专用佐剂组 普通稀释液组 20% 80% 40% 3倍剂量TJ株攻毒:3×105.0TCID50/头 无菌室内饲养,没有使用抗生素 2、“蓝定抗”细胞免疫特性研究 细胞因子检测 细胞亚型检测 IL-4 (pg/ml) IFN-γ IL-18 IL-12/IL-23 P40 NK (个/ul) CD3+(T) CD3+CD4+CD8-(Th) CD3+CD4-CD8+(Tc+Ts) Th/(Tc+Ts) CD3+ T细胞 CD3+CD4+CD8-(Th) CD3+CD4-CD8+(Tc+Ts) CD3+CD4-CD8- CD3+CD4+CD8+ Th0 Th1 Th2 T细胞亚群的分布 CD3+CD4+CD8-(Th)细胞增殖与分化 IL-12,IL-18,IFN-γ IL-4 Th0 Th1:介导细胞免疫 Th2:介导体液免疫 (促进抗体产生) 竞争 竞争 细胞因子 检测方法:ELISA IL-4 IFN-γ IL-18 IL-12/IL-23 P40 invitrogen(2.0pg/ml) invitrogen(2.0pg/ml) invitrogen(23.1pg/ml) RD (9.0pg/ml) 细胞因子检测 免疫前 免疫后 攻毒后 IL-4(pg/ml) 前3天 3天 7天 14天 21天 28天 3天 7天 14天 21天 28天 空-1 0 0 0 0 0 0 0 空-2 0 0 0 0 0 0 0 0 空-3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 空-4 0 0 0 0 0 0 0 0 空-5 0 0 0 0 0 0 0 0 D 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 专-1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 专-2 0 0

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