(精编)【医学课件】 成熟B细胞通过去分化成一种未定型祖细胞而转化为T细胞教学课件.pptVIP

Conversion of mature B cells into T cells by dedifferentiation to uncommitted progenitors;Abstract;;;; 1、所有的tumours中都发现有片段重组和存在Ig h的表达，说明是这些tumours源自于之前移植的细胞.很多的tumours里面发现有片段重组的Ig k和Ig l的存在。 这不同于被删除Pax5的pro-B cell，pro-B cell是不能产生VHJ558-DJH 和VК-JК重组体的。 2、这些late pre-B cell则产生了最初开始阶段就有的功能免疫球蛋白的重、轻链重组体。这个说明了在Cd19-cre Pax5fl/- mice身上的祖细胞淋巴瘤肯定是源自late pre-B 细胞，最大可能是来自于未成熟或者成熟的B cell 。确定了研究的目标细胞是未成熟的或者成熟的B cell，而不是B cell祖细胞。 ;证明细胞存在的不稳定性，即在祖细胞、B细胞和T细胞之间变化的关系;Lin- IgM+ IgDhigh Mature B cells（In vitro）; 所有的Rag2-/- Ly5.1+ mice在移植入Pax5-deleted B cell后都能很好的长出重构后的T cell，这个正好证明了以前研究得出的源自骨髓的去Pax5祖细胞在胸腺里面长成T淋巴细胞的发现。不过数量上只有野生型的三分之一左右。;通过将上面的实验分析我们知道，去除Pax5的成熟B cell在有限的几率下转变为未定型祖细胞，而最右边转移到Rag2-/- сγ-/- recipient mice中4周后用流式细胞分析得到b、c和d图结果，分析的说明B cell是先转移成祖细胞后再转移到胸腺等部位后重新形成T淋巴细胞的，而不是直接通过转分化为T cell的。 ;通过另外一个生长特点来区分进一步确定T cell是实验前的B cell转化而来的; 为了研究体内的B-cell-derived T cells我们使用了Tcra -/- mice作为移植体注射体外去除Pax5的成熟B cell。八个星期后这些 小鼠用绵羊红细胞(SRBC)进行免疫注射，十天后，用流式细胞技术和免疫组化分析了脾中的germinal-centre reaction，相比较Rag2 -/- mice,这些Tcra -/- mice有自然的B cell形态，仅仅没有产生CD4和CD8单阳性T cell。由于在脾脏中TCR-β+ T cell的缺失，这些Tcra -/- mice不能产生germinal-centre reaction和PNA + Fas + germinal-centre B cell。相比之下，这些重组的Tcra -/- mice包含了多克隆TCR-β+ T cell 。这些源自捐赠者的T cell能有效的诱导germinal-centre reaction和PNA + Fas + germinal-centre B cell （上图b、c）。显示出这些B-cell-derived T cell具有完全的功能。 ; 谱系特异性转录因子的异常表达使细胞有一种形态转变为另外一种形态，有文献证明了在体外转分化的B淋巴细胞能转变为巨噬细胞，通过逆转录病毒的CCAAT/enhancer-binding protein-α的表达表现出来。此外，通过向人体皮肤细胞转入Oct3/4, Sox2, c-Myc 和 Klf4四个基因使其在体外改造成类似胚胎干细胞的“万能细胞”。相比较这些获得功能的实验而言，这个实验证明通过去掉单一的转录因子Pax5能使成熟的B cell在体内去分化为未成熟的造血祖细胞，然后发展成T cell。显示出了Pax5基因在B cell去分化中的重要作用，也说明尽管处在不同时期，B cell仍然是一种极度不稳定性的存在细胞。 致癌基因Pax5的染色体易位能使人体产生急性淋巴母细胞白血病和非霍奇金淋巴瘤，一次广义上的分析有单等位基因的缺失或者Pax5的点突变的B cell祖细胞的实验体，结果显示32%出现了急性淋巴母细胞白血病。这些杂合基因说明Pax5突变杂合体能引起急性淋巴母细胞白血病。这个研究显示，在单Pax5等位基因的失活在缺失的致癌基因缺损还不足够诱导杂合的mice出现肿瘤。代之的Pax5的完全丢失却能产生淋巴瘤，因为Pax5 B细胞前体细胞在体内含有一种广泛意义上的自我更新潜能，这就像干细胞和致癌干细胞。这个缺失功能性的实验因此确定了Pax5基因在B淋巴细胞中系是一种肿瘤抑制基因。 ;Thank you for your attention