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2018学年高中生物第一部分微生物的利用第1课时大肠杆菌的培养和分离同步备课教学案浙科版选修.doc
第1课时 大肠杆菌的培养和分离
考试要求
知识内容 考试属性及要求 考情解读 大肠杆菌的培养和分离 加试 1.进行大肠杆菌的扩增,利用液体培养基进行细菌培养的操作。
2.进行大肠杆菌的分离,用固体平面培养基进行细菌的画线培养。
3.说明大肠杆菌培养的条件和实验原理。
一、微生物培养的基本条件
1.微生物基础知识
(1)微生物的特点:结构简单,形体微小。通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到,有的甚至没有细胞结构。体内一般不含叶绿素,不能进行光合作用。
(2)细菌的外形与大小
①外形分类
②大小:单细胞不分枝的原核微生物,细胞微小而透明。通常用适当染料染色后,再显微镜观察。
(3)细菌的繁殖:细菌以分裂的方式繁殖,分裂速度很快,约20分钟分裂一次。
(4)菌落
①概念:单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,就会形成一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。(如图)
②作用:细菌的菌落特征因种而异,菌落是鉴定菌种的重要依据。
2.培养基的种类
(1)按物理性质分类
种类 是否含凝固剂 用途 固体培养基 是 主要用于微生物的分离与鉴定等 液体培养基 否 主要用于扩大培养或工业生产
(2)按培养基的用途分类
种类 制备方法 用途 选择培养基 加入某种化学物质 从众多的微生物中分离所需微生物 鉴别培养基 加入某种试剂 鉴别不同种类的微生物
3.无菌技术
(1)含义:无菌技术不仅能防止实验室的培养物被其他外来微生物污染,保持微生物的纯培养,而且在分离、转接时亦能防止其他微生物污染。
(2)无菌操作
①对实验空间、操作台可用紫外线或酒精消毒,操作者的手用酒精消毒。
②实验用的培养器皿和培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌,接种环用灼烧方法灭菌。
③为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
1.结合所学知识,完成下图横线上大肠杆菌的结构名称,然后思考:
(1)大肠杆菌与酵母菌相比,在结构上最主要的区别是什么?
答案 大肠杆菌是原核生物,与酵母菌相比,最主要的区别是没有由核被膜包被的细胞核。
(2)大肠杆菌是革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌,在肠道中一般对人无害,但也有一些菌株对人体是有害的,可以侵袭肠黏膜并产生毒素。但是,任何大肠杆菌如果进入人的泌尿系统,都会对人体产生危害。
(3)应用:大肠杆菌是基因工程技术中被广泛采用的工具。
2.判断下面培养基的各种成分能提供的营养物质类别
成分 FeSO4 蔗糖 (NH4)2SO4 维生素 提供的营养 无机盐 碳源 氮源 生长因子
小贴士 (1(碳源的种类是判断微生物同化作用类型的依据,能利用无机碳源的生物是自养型的,只能利用有机碳源的生物是异养型的。含氮的有机物如蛋白质既可作为氮源,也可作为碳源。“细菌喜荤,霉菌喜素”,细菌培养基要用蛋白胨和酵母提取物来配制。霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁。
(2(其他条件:在提供几种主要营养物质的基础上,培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质及氧气的要求。例如:培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素;培养霉菌时需要将培养基的pH调至中性偏酸;培养细菌时需要将pH调至中性或微碱性;培养厌氧型微生物时需要提供无氧的条件。
3.比较消毒和灭菌的不同之处
比较项目 理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭 消毒 较为温和 部分对人体有害的生活状态的微生物 不能 灭菌 强烈 全部微生物 能
小贴士 (1(每个细菌细胞仅形成一个芽孢,故它无繁殖功能。芽孢有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压的能力。芽孢的休眠能力十分惊人,可保持几年到几十年的生活力。
(2(孢子是微生物产生的一种有繁殖或休眠作用的细胞。一般是单细胞,个体微小,通常是适应于从不利环境条件中存活下来,并在条件改变时产生新的营养体,能直接发育成新个体。
4.几种消毒和灭菌方法及其适用范围
类型 适用范围 操作方法 消
毒
方
法 煮沸消毒法 日常生活 100 ℃煮沸5~6 min 巴氏消毒法 不耐高温的液体 70~75 ℃煮30 min或80 ℃煮15 min 化学药剂 生物活体、水源等 擦拭等,如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源 紫外线 房间、仪器设备 紫外线照射30 min 灭菌
方法 灼烧 接种工具、接种时用的试管口或瓶口等 直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧 干热灭菌 耐高温、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等 物品放入干热灭菌箱,160~170 ℃加热1~2 h 高压蒸汽灭菌 培养基、培养皿等,生产和实验室常用 高压蒸汽灭菌锅内,100 kPa,温度121 ℃,15~30 min 过滤 不耐高温的
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