山羊MSH4和MSH5基因的cDNA克隆序列分析及组织表达.PDFVIP

生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2016, 32 3 :98-104 山羊 MSH4 和 MSH5 基因的 cDNA 克隆、序列分析及 组织表达 郑杰  刘霜  罗斌  胡亮  杨珂伟  字向东 （西南民族大学国家民委动物科学重点实验室，成都 610041） 摘 要 ： 以低繁藏山羊和高繁金堂黑山羊为研究对象，分别提取处于发情期的5 只藏山羊和5 只金堂黑山羊的卵巢、子宫、 输卵管、垂体的总RNA，并通过RT-PCR 技术对MSH4、MSH5 基因cDNA 进行克隆、序列分析，以Real-time PCR 技术对其进行 组织表达研究。结果表明，藏山羊和金堂黑山羊MSH4 基因编码区均长2 499 bp，编码832 个氨基酸，两品种基因编码区有5 处碱 基不同，并导致3 处氨基酸的差异 ；MSH5 基因编码区均长2 496 bp，编码831 个氨基酸，两品种基因编码区有9 处碱基不同，并 导致5 处氨基酸的差异。藏山羊MSH4 基因编码区核苷酸序列与金堂黑山羊、山羊、绵羊、牛、马、小鼠、褐家鼠、人的同源性 分别为 ：99.8%、99.8%、99.4%、98.1%、94.4%、85.1%、84.7% 和93.5% ；藏山羊MSH5 基因编码区核苷酸序列与金堂黑山羊、 山羊、牛、家犬、小鼠、褐家鼠、人的同源性分别为 ：99.6%、99.6%、97.3%、88.0%、85.8%、85.3% 和90.2%。MSH4 和MSH5 基因mRNA 在两个山羊品种的卵巢、子宫、输卵管、垂体中均有表达，但两品种间无显著性差异 （ 0.05）。说明MSH4 和MSH5 P 基因在动物进化中比较保守，与山羊多羔性状的相关性有待进一步研究。 关键词 ： 藏山羊 ；金堂黑山羊 ；Msh4 ；Msh5 ；克隆 ；定量PCR DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2016.03.016 ， cDNA Cloning Sequence Analysis and Tissue Expression of Gene MSH4 and MSH5 in Goats - - ZHENG Jie LIU Shuang LUO Bin HU Liang YANG Ke wei ZI Xiang dong （The Key Laboratory of Animal Science of State Ethnic Affairs Commission ，Southwest University for Nationalities ，Chengdu 610041 ） Abstract: The total RNA of ovary，endometrium，oviduct and pituitary extracted from 5 Tibetan goats and 5 Jintang black goats in the period of estrus were used to clone and analyze cDNA sequences of