祖师麻醋酸乙酯提取物体外抗炎作用及其机制.PDF

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 6 期 2011 年 6 月 ·1169 · 祖师麻醋酸乙酯提取物体外抗炎作用及其机制 1 2 1 1 1 1, 3 章丹丹 ，潘一峰 ，凌 霜 ，杨晓露 ，许锦文 ，卞 卡 1. 上海中医药大学 穆拉德中药现代化研究中心，上海 201203 2. 上海现代中医药股份有限公司，上海 200051 3. 美国德克萨斯大学休斯顿医学院 德克萨斯大学分子医学研究所，综合生物及药理学系，休斯顿 TX 77030 摘 要：目的 研究祖师麻醋酸乙酯提取物（EAEDGC ）的体外抗炎作用及其机制。方法 用 γ-干扰素（IFN-γ）和脂多糖 （LPS ）协同制备小鼠RAW264.7 细胞炎症模型，Griess 反应测定细胞上清液中 NO 生成量，MTT 法测定细胞活力，三价铁 还原抗氧化能力测试（FRAP assay ）测定细胞总抗氧化能力，RT-PCR 检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS ）、环氧化酶-2 （COX-2 ）、 血红素加氧酶-1 （HO-1 ）、白细胞介素-1β （IL-1β）、白细胞介素-6 （IL-6 ）、肿瘤坏死因子-α （TNF-α）mRNA 的表达；Western blotting 检测 iNOS、COX-2、HO-1 、p-ERK 蛋白表达水平。结果 EAEDGC 以剂量依赖方式抑制细胞上清液中NO 的生成， 提高细胞总抗氧化能力，下调 iNOS、IL-1β、IL-6 、TNF-α mRNA 及 iNOS、p-ERK 蛋白的表达，上调 HO-1 mRNA 和蛋白 表达，同时不影响细胞生长；但对 COX-2 mRNA 和蛋白表达影响不大。结论 EAEDGC 部分通过丝裂原活化蛋白激酶 （MAPK ）中的细胞外信号调节激酶（ERK ）信号转导通路抑制 iNOS 基因和蛋白的表达，从而抑制 NO 的生成，提高细胞 总抗氧化能力，同时下调 IL-1β、IL-6 、TNF-α炎症介质和上调抗炎介质 HO-1 的表达，进而发挥抗炎作用。 关键词：祖师麻醋酸乙酯提取物；抗炎机制；诱导型一氧化氮合酶；细胞因子；总抗氧化能力 中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2011)06 - 1169 - 05 In vitro anti-inflammatory effect of ethyl acetate extract from Daphnes Giraldii Cortex and their mechanisms 1 2 1 1 1 1, 3 ZHANG Dan-dan , PAN Yi-feng , LING Shuang , YANG Xiao-lu , XU Jin-wen , BIAN Ka 1. Murad Research Institute for Modernized Chinese Medicine, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, Shanghai 201203, China 2. Shanghai SUNDISE Chinese Medicine Co. Ltd., Shanghai 200051, China 3. Department of Integrative Biology and Pharmacology, Institute of Molecular Medicine, University of Texas Medical School, Houston 77030, USA Abstract: Objective To investigate in vitro anti-inflammat