生化药品生产技术知识1.ppt

生化药品生产技术; 1 生物药物 2 抗生素 3 生化药品 4 生物制品;生物制药及生物药物;;生化药品;生物制品;第一节 生化药品分类;氨基酸及其衍生物; 蛋白质是构成生物体的一类最重要的有机含氮化合物，是塑造一切细胞和组织的基本材料，是生命的物质基础。 随着现代生物技术的深入发展，生命的奥秘已经逐步被揭开，用重组技术生产的蛋白质药物正以惊人的速度突飞猛进。FDA已批准30多个重组药物，如insulin、rhGH、rTPA、干扰素-2a、α -2b、a-N3、β-1b、r、r-1b；EPO-a、β；1L-2、GSF、GM-CSF……2005年，全球为600多亿美元，从原占医药的4%迅速提高至11%。 ; 酶与辅酶; 多糖; 核酸类药物; 脂质类;图1. 2005版药典生化药品品种规格标准比例图;按原料来源分类：有利于对不同原料进行综合利用、开发研究。 人体组织来源 动物组织来源 植物组织来源 微生物来源 海洋生物来源;天然生物材料来源;第二节 生化药物特点;胰岛素：猪、牛、人； 菘蓝：板蓝根、大青叶； 微生物：抗生素、蛋白质、酶等；;2、种类多、含量低;3、种属特性;4、活性与结构相关 5、制备要求高 ;第三节 生化药物的制备;天然生物材料制备生化药物的过程;一 、生物材料的选择 ;2.杂质情况;3.有效成分的含量; 生理活性物质易失活与降解，采集时必须保持材料的新鲜。防止腐败、变质与微生物污染。如胰脏采摘后要立即速冻，防止胰岛素活力下降。 保存生物材料的主要方法有速冻、冻干、有机溶剂脱水，制成丙酮粉，或浸存于丙酮与甘油中等。 ;（一）组织与细胞的破碎 物理法 化学法 生物法;1.物理法; 超声细胞破碎仪 高压细胞破碎仪;2.化学法;（1）组织自溶法 利用组织中自身溶解酶的作用改变、破坏细胞结构，释放出目的物称为组织自溶法。 （2）酶解法 用外来酶处理生物材料，如用溶菌酶处理某些细菌，蜗牛酶等 ;（3）噬菌体法 用噬菌体感染细胞、裂解细胞，释放出内容物。 ;（二）细胞器的分离;（三）制备丙酮粉; 提取是利用制备目的物的溶解特性，将目的物与细胞的固形物成分或其它结合成分分离，使其由固相转入液相或从细胞生理状态转入特定溶液环境的过程。;（一）物质的性质与提取方法的选择; 其中最主要的是目的物与主要杂质在溶解度方面的差异以及它们的稳定性。操作者可根据文献资料及本人的试验摸索获得的有关信息，在提取过程中增加目的物的溶出度，尽可能减少杂质的溶出度。 ;（1）采用缓冲盐系统 在生物药物制备中，常用的缓冲盐有磷酸缓冲盐，柠檬酸缓冲盐，Tris缓冲液，醋酸缓冲盐，碳酸缓冲盐，硼酸缓冲盐和巴比妥缓冲盐等。 ;（2）添加保护剂;（3）抑制水解酶的作用：抑制剂、热等。 （4）其它保护措施：冷、热、酸、碱 ;１、温度 提取温度 ↑溶解度 ↑ 。 温度↑ 物料的粘度↓，有利于分 子扩散和机械搅拌。 对不耐热的生物活性物质的提取，一般在0~10℃进行提取。;２、酸碱度;盐溶作用：盐离子作用于生物大分子表面，增加了表面电荷，使之极性增加，水合作用增强，促使其形成稳定的双电层，此现象为盐溶作用。 盐析作用：指溶液中加入无机盐类而使某种物质溶解度降低而析出的过程 ;（四）提取方法;２、表面活性剂提取;溶剂提取法;1、常用溶剂（按亲水性增加排列如下）： 环己烷～石油醚→苯→乙醚→氯仿→乙酸乙酯 →正丁醇→丙酮→乙醇→甲醇→水。 ● 极性最大的有机溶剂：甲醇 ● 极性最小的有机溶剂：环己烷 ● 溶解范围最广的有机溶剂：乙醇;选择的溶剂 ;2、溶剂选择的原则 ①目标成分易溶，杂质成分难溶； ②惰性，不与目标成分反应，即使发生反应也应该属于可逆性的； ③经济、安全、后续操作容易进行。 ;⑵液－液萃取; 残留量计算公式;（一）盐析浓缩：硫酸铵沉淀蛋白质 （二）有机溶剂沉淀浓缩 在生物大分子的水溶液中，逐渐加入乙醇，丙酮等有机溶剂，可以使生化物质的溶解度明显降低，从溶液中沉淀出来。;（三）用葡聚糖凝胶（Sephadex）浓缩 （四）用聚乙二醇透析浓缩 （五）超滤浓缩 （六）真空减压浓缩与薄膜浓缩 真空减压浓缩在药物生产中使用较为普遍，具有生产规模较大，蒸发温度较低，蒸发速度较快等优点。 薄膜浓缩器的加