第二章 仪器分析技术知识-分光.pptVIP

1 第二章 中药制剂的仪器分析技术 【学习目标】 2 讲授内容 3 分光光度分析技术 分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内的吸光度或发光强度，对该物质进行定性或定量的分析方法。 波长 紫外光 200～400nm 可见光 400～760nm 某些物质对光有吸收 很多加入显色剂或经过一定的处理，故又可称比色分析使其显色后再测定 对光吸收具有加和性 4 紫外-可见分光光度法 也称为紫外-可见吸收光谱法 波长范围 200～400nm 灵敏度较高 10-4～10-6g/ml 准确度 0.5%，甚至可达0.2% 基本原理:Lamber-Beer定律 A:吸光度 T为透光率 K:吸收系数 C:溶液浓度 L:液层厚度 5 紫外-可见分光光度法 吸收光谱（吸收曲线） 6 紫外-可见分光光度法 吸收系数 摩尔吸光系数ε λ一定 C=1mol/L L=1cm时的吸光度 百分吸收系数 (比吸收系数) λ一定 C=1g/100ml L=1cm时的吸光度 ε和 关系 * 紫外-可见分光光度法 紫外-可见分光光度计基本结构 光源 可见光源 钨灯或卤钨灯： 350～2500nm 紫外光源 氢灯或氘灯： 160～375nm 200～350nm 吸收池（又称比色皿）：盛放被测溶液的容器 石英吸收池 可见光区 紫外光区 玻璃吸收池 可见光区 8 紫外-可见分光光度法 紫外-可见分光光度计的校正和检定 波长 汞灯、氘灯、钬玻璃、高氯酸钬溶液 紫外光区±1nm，500nm附近±2nm 吸光度准确度的校正 重铬酸钾的硫酸溶液 杂散光检查 10 紫外-可见分光光度法 溶剂要求 使用范围均不能小于截止使用波长 甲醇、乙醇的截止使用波长为205nm 方法 将溶剂置1cm石英吸收池中，以空气为空白（即空白光路中不置任何物质）测定其吸光度 220～240nm范围内不得超过0.40 241～250nm范围内不得超过0.20 251～300nm范围内不得超过0.10 300nm以上时不得超过0.05。 11 紫外-可见分光光度法 样品溶液的制备—样品前处理 一般都须定量操作 提取 分离 精制 仪器操作（略） 12 紫外-可见分光光度法 注意事项 量瓶和移液管：校正、检定，洗净 吸收池：匹配性（透光率相差0.3%以下） 拿位置：磨砂面 装溶液高度：4/5 透光面：要用擦镜纸由上而下擦拭干净 放入样品室：方向应相同 保存：洗净、晾干、防尘 污染 硫酸-发烟硝酸（3:1 V/V）混合溶液稍加浸泡后，洗净 铬酸钾清洁液清洗 13 紫外-可见分光光度法 注意事项 称量：应按《中国药典》规定要求 含量测定：2份，如为对照品比较法，对照品一般也应称取2份。平行操作，每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以内 鉴别或检查：1份。 稀释转移 次数应尽可能少 转移稀释时所取的容积一般应不少于5ml 吸光度：0.3～0.7之间 测定波长：规定波长±2nm以内 14 紫外-可见分光光度法 中药制剂检测中的应用 鉴别 检查 含量测定 对照品比较法 吸收系数法 计算分光光度法 比色法（含标准曲线法） 其中对照品比较法和比色法较为常用。 15 光源 单色器 样品池 检测器 记录装置 数据处理 报告书 紫外-可见分光光度法 测定波长的选择：max 吸光度读数范围的选择：A=0.3～0.7 样 参 调节光路 光学性质和厚度相同 样品池 样品溶液 ， 参比池 空白溶液 样品池 参比池 配制样品的溶剂 空白溶液 A T A ¾ ¾ ¾ ® ¾ + = = ¾ ¾ ¾ ® ¾ + ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ ® ¬ « % 100 0 紫外-可见分光光度法 原子吸收分光光度法 定义 原子吸收分光光度法（AAS）是基于蒸汽中基态原子对特征电磁辐射的吸收来测定试样中的该元素的含量的方法 遵循分光光度法的吸收定律 检测对象 呈原子状态的金属元素和部分非金属元素 测定 一般通过比较对照品溶液和供试品溶液的吸光度，求得供试品中待测元素的含量 18 原子吸收分光光度法 中药制剂检测中的应用 中药制剂的含量测定 铅、铬、砷、汞、铜 如健脾生血片和龙牡壮骨颗粒的含量测定使用的方法是原子吸收分光光度法中的标准曲线法 19 20 仪器分析法之 结 束