第十章 紫外-可见分光光度法教材课程.pptVIP

空间阻碍使共轭体系破坏，λmax蓝移， εmax 减小。 R=R=H λmax =294 nm, εmax=27600 R=H, R=CH3, λmax =272 nm, εmax=21000 2、取代基的影响 取代基 -SR -NR2 -OR -Cl -CH3 红移距离(nm) 45 40 30 5 5 助色团取代， π→π*跃迁吸收带发生红移。 3、溶剂的影响 气态 溶剂：环己烷 溶剂：水 对称四嗪在蒸气态、环己烷和水中的吸收光谱 1) 对吸收谱带精细结构影响 无溶剂效应 极性溶剂效应 π* n n π π π* 能量 2) 对π→π*跃迁和n→π*跃迁影响 溶剂极性增加， π→π* 跃迁吸收带红移， n→π*跃迁吸收带蓝移。 π→π*和n→π*跃迁的溶剂效应 溶剂 正己烷 CHCl3 CH3OH H2O π→π* λmax/nm 230 238 237 243 n→π* λmax/nm 329 315 309 305 报告某物的紫外、可见吸收光谱时，需注明所使用的溶剂。 3) 溶剂的选择 a. 溶剂应能很好地溶解被测试样，溶剂对溶质应是惰性的。 b. 在溶解度允许的范围内，尽量选择极性较小的溶剂。 c. 溶剂在样品的吸收光谱区应无明显吸收 第十章 紫外可见分光光度法 一、朗伯-比尔定律 二、偏离吸收定律因素 第二节 吸收定律 一、朗伯-比尔定律 1、透光率 （透射比、透射率） 透光率定义 T 取值为0.0 % ~ 100.0 % T = 0.0 % T = 100.0 % 入射光 I0 透射光 It 2、Lambert – Beer Law 当一定波长单色光通过某物质溶液时，入射光强度I0与透射光强度It之比的对数与该物质的浓度及液层厚度成正比。此时物质对光吸收的程度（吸光度，用A表示）数学表达式为 入射光 I0 透射光 It c: 溶液浓度 l: 液层厚度 E: 吸光系数 l 3、吸光度与透光率关系 透光率 吸光度 1.0 0.5 A C A 100 50 T % T T = 0.0 % A = ∞ T = 100.0 % A = 0.0 A = 0.4343 T = 36.8 % 4、吸光系数 E：比例常数 入射光波长 物质的性质 温度 取值与浓度的单位相关 c：mol / L E ? ? 摩尔吸光系数， L · mol –1 · cm -1 c：g / L E ? a 质量吸光系数， L · g –1 · cm -1 c：g / 100 mL E ? 百分比吸光系数 溶剂 5、吸光度的加合性 二、吸收定律偏离因素 标准曲线法测定未知溶液的浓度时 发现标准曲线常发生弯曲（尤其当 溶液浓度较高时），这种现象称为 吸收定律的偏离。 1、物理因素 难以获得真正的纯单色光。朗—比耳定律的前提条件之一是入射光为单色光。 分光光度计只能获得近乎单色的狭窄光带。复合光可导致对朗伯—比耳定律的正或负偏离。最主要的是非单色光作为入射光引起 的偏离。 2、化学性因素 朗—比耳定律的假定：所有的吸光质点之间不发生相互作用；该假定只有在稀溶液(c10-2mol/L)时才符合。 当溶液浓度c10－2mol/L时，吸光质点间可能发生缔合、聚集等相互作用，直接影响了对光吸收。 故：朗伯—比耳定律只适用于稀溶液。 另外当溶液中存在着离解、聚合、互变异构、配合物形成等化学反应时，也会使吸光质点浓度发生变化，影响吸光度。 例： 铬酸盐或重铬酸盐溶液中存在下列平衡： CrO42- ＋2H＋ = Cr2O72- ＋H2O 溶液中CrO42-、 Cr2O72-的颜色不同，吸光性质也不相同。故此时溶液pH 对测定有重要影响。 第十章 紫外可见分光光度法 一、基本组成 二、分光光度计类型 三、仪器测量误差 四、实验技术 第三节 分光光度计 一、分光光度计基本组成 0.575 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 I0 It 参比 样品 入射光 I0 透射光 It 二、分光光度计类型（1）单波长单光束分光光度计 0.575 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 （2）单波长双光束分光光度计 差值 光源 单色器 吸收池 检测