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骨髓细胞室操作卡
骨髓细胞室操作卡
瑞氏染色液
1.瑞氏色素1g 加10ml 甘油充分混合
2.甲醇500ml 渐加入上述溶液中
放置37℃温箱中或室温(+0.2g 姬姆萨/500ml 37℃,2~3天)
苏木紫染色液
1.苏木紫1g 95%酒精10ml
2.钾明矾或铵明矾20g 蒸馏水200ml
将2 液用烧杯装好加温,到瓶内明矾溶解后,加进1 液,烧沸取下后,
加入 0.5g 氧化汞粉末,很小心地渐渐加入以免发生危险。此时液体
变成深紫色,冷却后过滤,再加醋酸每 200ml 加 10ml,可增强其染
色能力,装瓶备用。
过氧化物酶染色(POX)
试剂:1.Washburn 氏染色液配制法
联苯胺 0.3g
95%乙醇 99ml
36% 亚硝基铁氰化钠 1ml(360mg溶1ml)
Washburn 氏液在棕色瓶内可保存10 个月左右
2.稀双氧水
1%过氧化氢液 1滴
蒸馏水 5ml
需临用前新鲜配制
操作:1.新鲜的涂片上加上0.3%联苯胺酒精溶液10 滴染一分钟
2.不将联苯胺液倾去,即加等量的稀双氧水染四分钟
3.用水冲洗,用95%的乙醇脱色。
4.用瑞氏染色液复染10-20分钟,水洗干后镜检
结果判断:阳性-胞浆内有兰色颗粒
标准 (一)无颗粒
(±)颗粒细小而分布松
(+)颗粒粗,局灶
(++)颗粒粗大,分布密
(+++)颗粒粗大,呈团
(++++)颗粒分布整个细胞
注意:计数100 只原始细胞,单、早幼粒不计在内
糖原染色(PAS)
试剂:
1.固定液--甲醇或95%乙醇
2.过碘酸溶液:
过碘酸 0.5g
1/5M 醋酸钠 5ml
蒸馏水 45ml
3.雪夫氏液:将200ml 蒸馏水煮沸,缓缓加入碱性品红(碱性复
红,指示剂)1.0g,待冷却至 50℃(60℃)时加入 1NHCL20ml,待冷却
至25℃(20℃)时加入2g 偏重亚硫酸钠,立即加盖使溶解,放暗处(冰
箱)过夜,取出时呈淡黄或淡红色,次日加活性碳1g(300mg 起吸附作
用),摇匀后过滤即可,置冰箱保存。
4.偏重亚硫酸钠溶液的配制(含SO2 的溶液):取 10%亚硫酸氢钠
5ml 加1NHCL5ml,加H2O 至100ml(临用前配)
5.苏木紫液或甲基绿
操作:1.涂片用甲醇固定5 分钟,水洗
2.放入溶液中氧化10 分钟(暗处),水洗待干
3.置雪夫氏液内染45 分钟(暗处),冬天37℃
4.用水冲洗
5.水洗待干(苏木紫 1 分钟)
结果:阳性-胞浆内呈红色颗粒或块状
粒系:(-)无色
(±)浆呈粉红色无颗粒
(+)浆呈淡红细颗粒
(++)浆红少颗粒
(+++)浆暗红少量颗
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