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第1章废水生物处理的动力学基础
第五节 微生物生长动力学 一、底物利用速率 米歇里斯-门坦 (Michaelis-Menten)方程式 一切生化反应都是在酶的催化下进行的。这种反应亦可以说是一种酶促反应或酶反应。酶促反应速度受酶浓度、底物浓度、pH、温度、反应产物、活化剂和抑制剂等因素的影响。 在有足够底物又不受其他因素影响时,则酶促反应速度与酶浓度成正比。 当底物浓度在较低范围内,而其他因素恒定时,这个反应速度与底物浓度成正比,是一级反应。 当底物浓度增加到一定限度时,所有的酶全部与底物结合后,酶反应速度达到最大值,此时再增加底物的浓度对速度就无影响,是零级反应,但各自达到饱和时所需的底物浓度并不相同,甚至差异有时很大。 浓度对酶反应速度的影响 vmax n=0 0n1 n=1 KS 底物浓度[S] 1/2 vmax 酶反应速度 v 中间产物假说: 酶促反应分两步进行,即酶与底物先络合成一个络合物(中间产物),这个络合物再进一步分解成产物和游离态酶,以下式表示: 式中,S代表产物,E代表酶,ES代表酶-产物中间产物(络合物),P代表产物。 从上式可以看出,当底物S浓度较低时,只有一部分酶E和底物S形成酶-底物中间产物ES。 此时,若增加底物浓度,则将有更多的中间产物形成,因而反应速度亦随之增加。 当底物浓度很大时,反应体系中的酶分子已基本全部和底物结合成ES络合物。 此时,底物浓度虽再增加,但无剩余的酶与之结合,故无更多的ES络合物生成,因而反应速度维持不变。 1913年前后,米歇里斯和门坦提出了表示整个反应中底物浓度与酶促反应速度之间关系的式子,称为米歇里斯-门坦方程式,简称米氏方程式,即: 式中:v——酶促反应速度;vmax——最大酶反应速度; ρS——底物浓度; Km——米氏常数。 此式表明,当Km和vmax已知时,酶反应速度与酶底物浓度之间的定量关系。 由上式得: 该式表明,当vmax/v=2或v=1/2vmax时,Km=ρS,即Km是v=1/2vmax时的底物浓度,故又称半速度常数。 米 氏 方 程 式 ⑴当底物浓度ρS很大时,ρS?Km,Km+ρS≈ρS,酶反应速度达到最大值,即v=vmax,呈零级反应,在这种情况下,只有增大底物浓度,才有可能提高反应速度。 实际应用时,我们采用了微生物浓度cx代替酶浓度cE。通过试验,得出底物降解速度和底物浓度之间的关系式,类同米氏方程式,如下: 式中:Ks为饱和常数,即当时的底物的浓度,故又称半速度常数。 ⑵当底物浓度ρS较小时,ρS?Km,Km+ρS=Km,酶反应速 度和底物浓度成正比例关系,即 呈一级反应。此 时,增加底物浓度可以提高酶反应的速度。但随着底物浓度的增加,酶反应速度不再按正比例关系上升,呈混合级反应。 米 氏 常 数 的 测 定 对于一个酶促反应,Km值的确定方法很多。实验中即使使用很高的底物浓度,也只能得到近似的vmax值,而达不到真正的vmax值,因而也测不到准确的Km值。为了得到准确的Km值,可以把米氏方程的形式加以改变,使它成为直线方程式的形式,然后用图解法定出Km值。 目前,一般用的图解求Km值法为兰微福-布克作图法或称双倒数作图法。此法先将米氏方程改写成如下的形式,即: 实验时,选择不同的ρS,测定对应的v。求出两者的倒数,作图即可得出如下图的直线。量取直线在两坐标轴上的截距1/vmax和 -1/Km ,就可以求出Km及vmax。 米 氏 常 数 的 测 定 二、微生物群体的增长速率 莫诺特(Monod)方程式 微生物增长速度和微生物本身的浓度、底物浓度之间的关系是废水生物处理中的一个重要课题。有多种模式反映这一关系。当前公认的是莫诺特方程式: 式中:ρS——限制微生物增长的底物浓度,mg/L; μ——微生物比增长速度,即单位生物量的增长速度。 式中:ρX——微生物浓度,mg/L; μmax —— μ的最大值,底物浓度很大,不再影响微生物 的增长速度时的μ值; KS——饱和常数。 vmax n=0 0n1 n=1 KS 底物浓度[S] 1/2 vmax 酶反应速度 v 以及 代入式 得: 式中:q和qmax为底物的比降解速度及其最大值;ρs为底物浓度;Ks为饱和常数。 目前废水生物 处理工程中常
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