医学免疫学-第四章_免疫球蛋白.ppt

医学免疫学 内容提要 概述 免疫球蛋白的结构 抗体的异质性 五类免疫球蛋白的生物学特性 免疫球蛋白基因及抗体的多样性 人工制备抗体 一、概 述抗体 antibody Ab 是B细胞识别抗原后增殖分化为浆细胞所 产生的一种蛋白质，主要存在于血清等体液中，能与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白，具有免疫功能 概念 具有抗体活性或化学结构与抗体类似的球蛋白 抗体和免疫球蛋白的关系: 抗体都是免疫球蛋白，并非所有免疫球蛋白都具有抗体活性 类型 分泌型（secreted Ig, sIg） 膜 型（membrane Ig, mIg） 理化性质 属球蛋白，在电泳图谱上大部分抗体活性在?球蛋 白，具有异质性 二、Ig的结构(IgG 为例) 重链与轻链 可变区和恒定区 铰链区 功能区 其它成分 水解片段 基本结构 * 由两条相同的重链和两条相同的轻链通过二硫键连接而成的四肽链分子 重链与轻链 * 重链（heavy chain, H链） 约450-550氨基酸 1）根据重链恒定区抗原特异性不同，可将重链分为5种：?、?、?、?、?。其相应Ig为IgG、IgM、IgA、IgD、IgE * 轻链（light chain, L链） 约214个氨基酸 1）根据轻链恒定区抗原性不同，分为?和?两种。一个天然的Ig 分子上轻链类型是相同的 2）在不同种属的动物?与?链的比例不同： 人： 2 ：1 小鼠：20 ：1 可变区和恒定区 1.可变区（variable region，V区）：位于Ig分子N端，占轻链1/2和重链1/4或1/5；不同抗体其IgV区氨基酸组成和排列有较大差异，并决定抗体与抗原结合的特异性 * 超变区（hypervariable region, HVR）：在VL和VH中，某些特定位置的氨基酸残基的排列顺序高度可变，此为HVR。轻、重链各有3个HVR *互补决定区（complementarity-determining region, CDR）：超变区乃抗体与抗原（表位）特异性结合的位置，此为CDR * 骨架区（framework region, FR）：V区中非HVR部位的氨基酸组成和排列相对保守，此为FR。VH和VL各有4个FR 2.恒定区（constant region,C区)：位于Ig 分子的C端，占轻链1/2和重链3/4（IgA、IgD）或4/5（IgM、IgE）。在同一种属中，同一类重链和同一类轻链C区氨基酸的组成或排列比较恒定。介导Ig多种生物学功能 铰链区 位于CH1和CH2之间可转动的区，含丰富的脯氨酸，易伸展弯曲，有利于Ig V区与抗原互补性结合；有利于暴露补体结合位点；对蛋白酶敏感 其它成分 J链（joining chain） 分泌片（secretory piece, sp） 水解片段 功能区 Ｊ链和分泌片 Ｊ链 joining chain 由浆细胞合成的富含半胱氨酸的酸性糖蛋白，主要作用是在羧基端连接Ｉg 单体为双聚体或五聚体，起稳定多聚体结构及参与体内转运的作用 分泌片 secretory piece, SP 分泌片是由粘膜上皮细胞合成，并在IgA二聚体形成后通过二硫键以共价键方式连接在C区C端上。 一般认为SIgA可能以膜结合蛋白形式存在于粘膜表面，分泌片选择性地介导IgA 二聚体的装配和转运，并有稳定SIgA的结构，避免蛋白酶的消化水解 免疫球蛋白的水解片段 木瓜蛋白酶(papain)水解IgG：得到两个相同的Fab段和一个Fc段  胃蛋白酶(pepsin)裂解IgG：得到一个具有双价活性的F（ab’）2段和若干个小分子多肽碎片（pFc’） 免疫球蛋白的功能区 Ig的多肽链分子可折叠成若干个由链内二硫键连接的球形结构。每个球形结构约由110个氨基酸组成，具有一定的生理功能，故称为功能区（domain） VH和VL：与抗原特异性结合的部位 CL和CH1：某些同种异型（allotype）遗传标记 IgG的CH2、IgM的CH3： 补体C1q结合点 激活补体经典途径 IgG的CH3： 结合单核/巨噬细胞表面FcR 不同生物学效应 免疫球蛋白的结构域 Ig的轻、重链每隔110个氨基酸残基即由链内二硫键连接成一个能行使特定功能的球形结构----结构域，其二级结构是由几股多肽链折叠形成的两个反向平行的β片层。两个反向平行的β片层中心的两个半胱氨酸残基由一