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耐碳青霉烯类抗生素的G-杆菌 指对碳青霉烯类抗生素亚胺培南、美罗培南等耐药的G-杆菌,主要为不动杆菌属(鲍曼和非鲍曼不动杆菌)、铜绿假单胞菌,近几年出现耐碳青霉烯类抗生素的肠杆菌科,需引起重视。 耐甲氧西林葡萄球菌(methecillin resistance staphylococcus,MRS) CLSI规定,葡萄球菌如对苯唑西林(或甲氧西林)耐药:对青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类和含酶抑制剂的复方制剂均应报告耐药,而不考虑体外药敏结果。 耐高浓度庆大霉素肠球菌(High level aminoglycosides resistance in Enterococcus) CLSI规定,肠球菌引起的全身性严重感染,常联合应用β-内酰胺类和氨基糖苷类抗生素,如果肠球菌对高浓度庆大霉素耐药,则联合用药无效。 耐万古霉素肠球菌(VRE),用E-test法验证。 上述多重耐药菌、泛耐药菌,要求每天在检验单审核结束后,及时向临床科室和医院感染控制科报告,以及时采取相应的防控措施,避免多重耐药菌、泛耐药菌的扩散、流行或暴发。 第五部分 真菌G和GM实验 报“分离出某种致病菌,比例,药敏”: 分离出致病菌,而不是常见的正常菌群,且具有优势,约占血平板菌群总数的百分比%; 同一病人如痰中连续分离出同一种菌,3天内如果已经做过药敏试验,则不再做药敏; 同一病人痰中细菌的种类和比例,会随着治疗情况变化,也受留取痰标本的质量影响。 结果报告形式 报“正常菌群”: 培养出细菌种类较多,无优势菌、无致病菌; 可能标本采集不合格,为口水样痰; 可能病人抵抗力弱,由条件致病菌(非致病菌)引起感染。 结果报告形式 报“正常菌群”: 可能病毒、支原体、衣原体等血平板无法培养的病原体; 可能是生长缓慢或难于培养的细菌; 未来发展方向利用高通量测序技术。 结果报告形式 第四部分 细菌真菌耐药性检查 一、常用药敏试验方法二、常用抗生素种类三、药敏试验结果解读 一、常用药敏试验方法 (1)MIC稀释法 (2)K-B纸片扩散法 (3)E-test法 MIC稀释法一般在琼脂或肉汤中将抗菌药物系列对倍稀释,定量接种待检菌, 35℃培养18至24小时后观察结果; 抑制检测菌肉眼可见生长的最低药物浓度,即最小抑菌浓度; MIC稀释法结果以MIC(μg/ml)数值报告,数值越小越敏感,与K-B法相反; (1)MIC稀释法 细菌自动鉴定及药敏分析仪 MIC稀释法 药敏试验孔 生化试验 细菌鉴定孔 MIC稀释法药物浓度主要包括折点浓度,可以判断敏感、中介、耐药, 少数药物如亚胺培南、美罗培南、头孢他啶,万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺等在判断敏感的基础上,又增加了一些低浓度,以利于合理选用药量, 不同抗生素判断的折点浓度不同,故不同抗生素之间的MIC值没有可比性。 (2)K-B纸片扩散法 补充药敏板没有的抗生素,如头孢哌酮/舒巴坦。 含有定量抗菌药物的纸片,贴在已接种待检菌的MH平板上, 纸片中所含的药物,吸取琼脂中的水分溶解后,不断地向纸片周围区域扩散,形成递减的药物梯度浓度。 在纸片周围抑菌浓度范围内,细菌的生长被抑制,形成透明的抑菌圈。 抑菌圈大小,反映待检菌对测定药物敏感程度。 不同抗生素有不同的判断标准,不同抗生素的抑菌圈大小没有可比性。 (3)E-test法 结合K-B法和稀释法的优点; 原理同稀释法检测,操作同K-B法简单; 试纸条上含干化、稳定、浓度由高到低呈指数梯度分布的某种抗菌药物。 补充鉴定药敏板没有的抗生素,如替加环素(老虎素)。 二、常用抗生素种类 临床和实验室标准化委员会(clinical and laboratory standards of institute, CLSI)系列指南,每年更新。 多烯类:两性霉素B、制霉菌素。 唑类:克霉唑、咪康唑、益康唑、氟康唑、酮康唑、伊曲康唑、伏立康唑。 核苷类:氟胞嘧啶。 棘球白素类:卡泊芬净。 真菌药敏试验常用药物 三、药敏试验结果解读 临床和实验室标准化委员会(clinical and laboratory standards of institute, CLSI)系列指南,每年更新。 敏感(Susceptible,S) 是指菌株能被使用推荐剂量治疗感染部位可达到的抗菌药物浓度所抑制,推荐使用。 中介(Intermediate,I) 指抗菌药物MIC接近血液和组织中通常可达到的浓度,疗效低于敏感菌株。 还表示药物在生理浓集的部位具有临床效力(如尿液中的喹诺酮类和β-内酰胺类),或者可用高于正常剂量的药物进行治疗(如β-内酰胺类)。 另外,中介还作为缓冲区,以防止微小的、未受控制的技术因素导致较大的错误结果,
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